Anticorps monoclonal de lapin anti-humain KIR2DL2/KIR2DL3 conjugué pour IF/ICC et FC - P43628

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KIR2DL2/KIR2DL3

• Les protéines cibles KIR2DL2 et KIR2DL3 sont des membres de la famille des récepteurs de type immunoglobuline des cellules tueuses (KIR). Les détails fonctionnels suivants sont dérivés de la caractérisation de KIR2DL3 (UniProt P43628).
• KIR2DL3, également connu sous le nom de CD158b, NKAT2 et récepteur p58 NK, est un récepteur inhibiteur exprimé sur les cellules tueuses naturelles (NK).
• Il se lie spécifiquement aux allèles HLA-C (HLA-Cw1, HLA-Cw3 et HLA-Cw7), supprimant ainsi l'activité des cellules NK et empêchant la lyse des cellules cibles.
• Le récepteur est une protéine transmembranaire localisée à la membrane cellulaire, classée comme une glycoprotéine membranaire de type I à passage unique sur la base de ses caractéristiques structurales.
• Structurellement, il contient des domaines de type immunoglobuline et nécessite des ponts disulfure pour un repliement correct, comme indiqué par ses mots-clés protéiques.
• L'épissage alternatif du gène KIR2DL3 produit de multiples isoformes, qui peuvent présenter des variations dans la spécificité du ligand ou la capacité de signalisation.
• De plus, il subit des modifications post-traductionnelles, notamment une glycosylation, courante parmi les récepteurs immunitaires et influençant l'expression à la surface cellulaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène comprend le domaine extracellulaire (aa 22-245) de KIR2DL3, susceptible de présenter des épitopes natifs adaptés à la reconnaissance de KIR2DL2 et KIR2DL3 à la surface cellulaire.
• Pour la cytométrie en flux (FC), le conjugué direct élimine le besoin de détection par anticorps secondaire, réduisant le bruit de fond et simplifiant le protocole de marquage. Assurez une compensation appropriée en combinaison avec d'autres fluorophores.
• En immunofluorescence (IF/ICC), les étapes de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées en fonction de la localisation membranaire plasmique de la cible. Un marquage sans perméabilisation peut être utilisé pour détecter les récepteurs localisés en surface.
• Étant donné l'expression restreinte du récepteur aux cellules NK et à certains sous-ensembles de cellules T, utilisez un contrôle positif pertinent tel que des cellules mononucléées du sang périphérique humain (PBMC) ou des lignées de cellules NK pour la validation initiale.
• Les performances de l'anticorps peuvent varier selon les méthodes de préparation des échantillons ; titrez l'anticorps (par exemple, 0,1-1 µg/mL) pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre test spécifique.
• Une réactivité croisée avec KIR2DL2 humain est attendue sur la base de l'homologie de séquence ; cependant, confirmez la spécificité dans votre système modèle en utilisant des contrôles d'invalidation génique (knockout ou knockdown) appropriés si nécessaire.

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