anticorps monoclonal de lapin anti-IL9 humain pour IF/ICC et FC (intra) - P15248

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'interleukine-9

• L'interleukine-9 (IL-9) est une cytokine multifonctionnelle, également connue sous les noms de cytokine P40 et de facteur de croissance des lymphocytes T P40, principalement sécrétée par les lymphocytes T auxiliaires de type 2, les mastocytes et les cellules NKT.
• L'IL-9 joue un rôle important dans la réponse immunitaire contre les parasites et affecte la perméabilité de l'épithélium intestinal ainsi que l'immunité adaptative. Références associées : PMID:29742432
• Elle induit la différenciation de sous-populations spécifiques de lymphocytes T, telles que les lymphocytes T auxiliaires producteurs d'IL-17 (TH17), et favorise la prolifération et la différenciation des mastocytes.
• L'IL-9 transmet ses signaux par l'intermédiaire d'un récepteur hétérodimérique composé du récepteur de l'IL-9 (IL9R) et de la chaîne gamma commune (IL2RG), activant les kinases JAK1/JAK3 ainsi que les programmes transcriptionnels STAT1, STAT3 et STAT5 en aval.
• Au niveau subcellulaire, l'IL-9 est une protéine sécrétée qui agit comme une cytokine extracellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et un résidu d'acide pyrrolidone carboxylique ; elle appartient à la famille des cytokines/facteurs de croissance.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 19-144 de l'IL-9 humaine, couvrant la forme mature sécrétée ; envisagez d'utiliser cet anticorps pour détecter la cytokine mature dans les échantillons biologiques.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation afin de permettre l'accès à la fraction sécrétée ou intracellulaire de l'IL-9.
• Pour la cytométrie en flux intracellulaire (FC), utilisez des protocoles standard de marquage intracellulaire avec des tampons de perméabilisation appropriés et incluez des contrôles non stimulés afin d'évaluer le bruit de fond.
• Comme l'IL-9 est sécrétée, la stimulation des cellules avec de la PMA/ionomycine ou un antigène en présence d'un inhibiteur de la sécrétion (par exemple, la brefeldine A) peut améliorer la détection.
• Validez la spécificité de l'anticorps à l'aide de lignées cellulaires invalidées pour l'IL-9 ou surexprimant l'IL-9, ou par préincubation avec la protéine IL-9 recombinante.

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