anticorps de lapin anti-IL-1β humaine mAb pour la cytométrie en flux intracellulaire - P01584

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’interleukine-1 bêta

• L’IL-1β (interleukine-1 bêta, également appelée cataboline) est une cytokine pro-inflammatoire puissante et un membre de la famille de l’interleukine-1. Elle est codée par le gène IL1B chez l’être humain (Gene ID : 3553).
• L’IL-1β agit comme un pyrogène endogène clé, induisant la synthèse de prostaglandines, l’afflux et l’activation des neutrophiles, la stimulation des lymphocytes T et B, ainsi que la prolifération des fibroblastes et la production de collagène. Références associées : PMID:3920526
• Elle favorise la différenciation des cellules Th17 et agit en synergie avec l’IL-12 pour induire la synthèse d’IFN-γ par les cellules Th1. Références associées : PMID:10653850
• L’IL-1β contribue à l’angiogenèse en induisant la production de VEGF en synergie avec le TNF et l’IL-6. Références associées : PMID:12794819
• Après l’activation de l’inflammasome et la pyroptose, l’IL-1β mature est libérée par les pores de la gasdermine-D (GSDMD), jouant un rôle essentiel dans la transmission de l’inflammation en aval de la mort cellulaire. Références associées : PMID:33377178 PMID:33883744
• Lors d’une infection cutanée à Streptococcus pyogenes, l’IL-1β agit comme un capteur : elle est clivée et activée par la protéase bactérienne SpeB, déclenchant une réponse inflammatoire qui limite la croissance bactérienne. Références associées : PMID:28331908
• Au niveau subcellulaire, l’IL-1β se trouve dans le cytoplasme, le cytosol et les lysosomes, et est sécrétée dans le milieu extracellulaire, notamment via les exosomes.
• Elle est principalement exprimée au niveau protéique dans les monocytes et les macrophages activés.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène correspond à l’IL-1β mature (aa 117-269), ce qui implique que l’anticorps peut détecter à la fois les formes précurseur et clivée. Pour la cytométrie en flux intracellulaire, veillez à effectuer une fixation et une perméabilisation approfondies.
• Optimisez les conditions de perméabilisation (par exemple avec de la saponine ou du méthanol) afin de préserver l’accessibilité de l’épitope tout en permettant l’entrée de l’anticorps. Ajoutez si nécessaire un marqueur de viabilité pour exclure les cellules mortes.
• Validez l’anticorps dans votre contexte cellulaire spécifique en stimulant les cellules avec des activateurs connus de l’inflammasome (par exemple, LPS + ATP) et en comparant les résultats à ceux de témoins non stimulés.
• Effectuez une expérience de titrage afin de déterminer la concentration optimale d’anticorps, en équilibrant le signal spécifique et le bruit de fond dans les cellules perméabilisées.
• Cet anticorps est spécifique de l’IL-1β humaine ; une réactivité croisée avec l’IL-1β de souris ou de rat n’est pas attendue sur la base de la séquence de l’immunogène, mais doit être vérifiée en cas d’utilisation chez d’autres espèces.

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