Anticorps monoclonal de lapin anti-IgG humaine (Fc) pour cytométrie en flux - P01857

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IgG Fc humaine (IGHG1)

• IGHG1 code pour la région constante de la chaîne lourde gamma-1 des immunoglobulines, un composant clé des anticorps IgG1. Cette région définit l'isotype et médie les fonctions effectrices via le fragment Fc. Références connexes : PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Les molécules d'IgG1 sont des glycoprotéines sécrétées ou des récepteurs liés à la membrane sur les cellules B. Dans l'immunité humorale, l'Ig membranaire sert de récepteur des cellules B et, lors de la liaison à l'antigène, déclenche l'activation des cellules B et leur différenciation en plasmocytes sécrétant des anticorps. Références connexes : PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• La région Fc interagit avec les récepteurs Fc sur les cellules immunitaires innées et le complément C1q, déclenchant la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC), la phagocytose dépendante des anticorps, la cytotoxicité dépendante du complément (CDC) et les réponses inflammatoires. Références connexes : PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Le locus de la chaîne lourde des immunoglobulines subit une recombinaison V(D)J, une hypermutation somatique et une recombinaison de changement de classe pour générer un répertoire d'anticorps diversifié, l'IgG1 étant la sous-classe la plus abondante dans le sérum humain.
• La protéine contient des domaines d'immunoglobuline conservés stabilisés par des ponts disulfure et est N-glycosylée en Asn-180, ce qui est essentiel pour un repliement correct et la liaison au récepteur Fc.
• À l'échelle subcellulaire, l'IgG1 est soit ancrée à la membrane (via un domaine transmembranaire) à la surface des cellules B, soit sécrétée sous forme d'anticorps soluble ; la région Fc médie le transport à travers les barrières épithéliales via le récepteur Fc néonatal.
• IGHG1 est situé sur le chromosome 14 au sein du locus de la chaîne lourde des Ig et est exprimé spécifiquement dans les cellules B et les plasmocytes ; sa région constante est échangée lors du changement de classe depuis l'IgM/IgD.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 100-330 de la région Fc de l'IgG1 humaine, couvrant les domaines CH2 et CH3, qui sont hautement conservés parmi les allotypes de l'IgG1. Assurez-vous d'utiliser des témoins appropriés (par exemple, témoins d'isotype IgG) lors de l'utilisation de cet anticorps en cytométrie en flux.
• La concentration de travail typique pour la cytométrie en flux doit être optimisée par titration ; envisagez d'utiliser 0,5 à 5 µg par test pour le sang total humain ou les PBMC.
• Cet anticorps est spécifique de la région Fc de l'IgG humaine ; testez la réactivité croisée avec d'autres espèces si des expériences multi-espèces sont prévues. Il ne se lie pas aux fragments Fab.
• Pour minimiser le bruit de fond médié par les récepteurs Fc, bloquez préalablement les cellules avec du sérum humain ou un blocage Fc avant la coloration.
• Utilisez une fixation fraîche au paraformaldéhyde (0,5-1 %) après la coloration pour préserver la fluorescence ; évitez le méthanol car il pourrait dénaturer la cible.

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