Lapin anti-Humain HER2/ErbB2 Anticorps Monoclonal pour Cytométrie en Flux - P04626

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de HER2/ErbB2

• HER2/ErbB2 est une protéine kinase réceptrice à tyrosine qui fonctionne au sein de complexes de récepteurs de la surface cellulaire, nécessitant un corécepteur pour la liaison du ligand. C'est une composante essentielle du complexe du récepteur de la neureguline, bien que les neuregulines n'interagissent pas directement avec lui.
• La protéine régule la croissance et la stabilisation des microtubules via l'axe de signalisation MEMO1-RHOA-DIAPH1, qui inhibe GSK3B et favorise la localisation membranaire de APC et MACF1, critiques pour la capture des microtubules.
• Dans le noyau, HER2 agit comme un régulateur transcriptionnel : il se lie au promoteur PTGS2/COX-2 pour activer la transcription, et participe à l'activation transcriptionnelle de CDKN1A de concert avec STAT3 et SRC.
• Il est également impliqué dans la transcription des gènes d'ARNr par l'ARN polymérase I, améliorant ainsi la synthèse des protéines et la croissance cellulaire.
• Au niveau subcellulaire, HER2 se localise à la membrane cellulaire, à la membrane en ruffles, aux endosomes précoces, au cytoplasme (région périnucléaire) et au noyau, reflétant ses doubles rôles de signalisation et de transcription.
• L'expression est observée dans une variété de tissus tumoraux, y compris les cancers du sein primitifs, de l'intestin grêle, de l'œsophage, du rein et de la cavité orale, soulignant son importance oncogénique.
• Les caractéristiques structurelles clés comprennent un peptide signal, un grand domaine extracellulaire, une hélice transmembranaire unique et un domaine tyrosine kinase intracellulaire. Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, la glycosylation et la formation de ponts disulfures.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Cet anticorps convient à la cytométrie en flux (FC) et reconnaît le domaine extracellulaire de HER2 humain. Utilisez des lignées cellulaires HER2-positives appropriées (ex : SK-BR-3, BT-474) pour le contrôle positif, et des lignées HER2-négatives (ex : MCF-7) comme contrôle négatif.
• Pour le marquage de surface cellulaire, récoltez des cellules vivantes et effectuez le marquage sans fixation/perméabilisation pour préserver l'épitope extracellulaire. Incluez un contrôle d'isotype et un blocage Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour vos conditions d'essai spécifiques ; les concentrations de départ typiques vont de 0,1 à 1 µg par test.
• Puisque l'immunogène couvre les acides aminés 23–652, l'anticorps peut ne pas détecter les isoformes manquant de cette région ou celles présentant des troncations N-terminales. Validez l'expression dans votre système cellulaire cible si vous utilisez des isoformes alternatives.
• Protégez le conjugué d'une exposition prolongée à la lumière pour maintenir la stabilité de la fluorescence. Stockez l'anticorps comme recommandé et évitez les cycles répétés de congélation-décongélation.

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