Anticorps monoclonal lapin anti-Flt3/CD135 humain pour cytométrie en flux - P36888

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Flt3/CD135

• Encodée par le gène FLT3, la tyrosine kinase réceptrice de type protéique FLT3 (aussi appelée CD135, FLK-2, FLK2, STK1) est un récepteur de surface cellulaire appartenant à la famille des tyrosine kinases réceptrices de classe III.
• Agit comme récepteur pour la cytokine FLT3LG, jouant un rôle essentiel dans la régulation de la différenciation, la prolifération et la survie des cellules progénitrices hématopoïétiques et des cellules dendritiques.
• Après liaison au ligand, FLT3 active des voies de signalisation en aval incluant RAS/MAPK, PI3K/AKT/mTOR et STAT5, via la phosphorylation de protéines adaptatrices et de kinases telles que SHC1, AKT1, MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1 et STAT5A/B.
• Les mutations entraînant une activité kinase constitutive sont associées à des hémopathies malignes, car elles favorisent la prolifération cellulaire incontrôlée et la résistance à l'apoptose.
• Principalement localisée sur la membrane cellulaire sous forme de protéine transmembranaire à passage unique, avec son domaine de liaison au ligand exposé à l'extérieur et son domaine kinase à l'intérieur de la cellule ; elle est également détectée dans la lumière du réticulum endoplasmique.
• Exprimée à haut niveau dans la moelle osseuse, les cellules souches hématopoïétiques, les cellules progénitrices myéloïdes et les cellules progénitrices granulocytes/macrophages ; on la trouve également dans le foie, le thymus, la rate, les ganglions lymphatiques, et à des niveaux plus faibles dans le rein et le pancréas ; elle est notablement sur-exprimée dans la leucémie T.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, la phosphorylation, la formation de ponts disulfures et l'ubiquitination, qui régulent sa stabilité, sa localisation et son activité.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, qui peuvent influencer la fonction du récepteur et les profils d'expression spécifiques des tissus.

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps monoclonal est conçu pour des applications de cytométrie en flux (FC). Réalisez des expériences de titration pour déterminer la concentration optimale adaptée à votre type cellulaire et votre dispositif d'essai.
• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire (aa 27-163), ce qui indique que l'anticorps cible la région extracellulaire de FLT3. Utilisez des contrôles d'isotype appropriés et des étapes de blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• FLT3 étant exprimé sur les cellules progénitrices hématopoïétiques et les cellules dendritiques, prévoyez d'utiliser des contrôles positifs (par exemple, lignées cellulaires de leucémie) et négatifs validés lors de la configuration de votre panel de cytométrie en flux.
• La conjugaison directe à l'élimine le besoin d'un anticorps secondaire, ce qui simplifie le protocole de coloration et peut réduire le bruit de fond.

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