Anticorps monoclonal de lapin anti-EGFR humain pour IF/ICC et FC - P00533

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’EGFR

• Le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) est une tyrosine kinase réceptrice qui lie les ligands de la famille de l’EGF et active des cascades de signalisation en aval, notamment les voies RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC et STAT, afin de réguler des réponses cellulaires telles que la prolifération et la survie.
  Références associées : PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• Les ligands connus de l’EGFR comprennent l’EGF, le TGF-α, l’amphiréguline (AREG), l’épigène (EPGN), la bétacelluline (BTC), l’épiréguline (EREG) et l’EGF lié à l’héparine (HBEGF).
  Références associées : PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• L’EGFR peut également activer la voie de signalisation NF-kappa-B.
  Références associées : PMID:11116146
• Le récepteur phosphoryle directement d’autres protéines, telles que RGS16 (établissant un lien avec la signalisation des protéines G) et MUC1 (favorisant l’interaction avec SRC et la β-caténine).
  Références associées : PMID:11602604, PMID:11483589
• L’EGFR régule positivement la migration cellulaire par son interaction avec CCDC88A/GIV, qui retient le récepteur à la membrane cellulaire après stimulation par le ligand.
  Références associées : PMID:20462955
• L’isoforme 2 de l’EGFR peut agir comme antagoniste de l’action de l’EGF et est notamment exprimée dans les cancers de l’ovaire.
• Les localisations subcellulaires comprennent la membrane cellulaire, la membrane du réticulum endoplasmique, la membrane de l’appareil de Golgi, la membrane nucléaire, l’endosome, le noyau ainsi que des formes sécrétées. La protéine subit d’importantes modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation, la phosphorylation, l’ubiquitination et la palmitoylation.
• L’EGFR sert également de récepteur hôte pour l’entrée du virus de l’hépatite C (VHC), en favorisant la formation de complexes CD81-CLDN1 et en renforçant la fusion des membranes virales.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 335–525) de l’EGFR humain. Comme l’anticorps est directement conjugué à , il peut être utilisé immédiatement pour l’immunofluorescence (IF/ICC) et la cytométrie en flux (FC), sans nécessiter de détection secondaire.
• Pour l’IF/ICC, envisagez des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés afin de préserver la conformation native de la protéine et l’accessibilité de l’épitope dans votre type cellulaire spécifique.
• L’anticorps est spécifique de l’EGFR humain ; vérifiez la réactivité croisée en cas de modélisation d’autres espèces.
• Incluez des contrôles positifs et négatifs (par exemple, des lignées cellulaires surexprimant l’EGFR et des lignées knockout) afin de confirmer la spécificité du signal.

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