mAb de lapin anti-EGFR humain pour IF/ICC, FC - P00533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EGFR

• L'EGFR (récepteur du facteur de croissance épidermique) est un membre de la famille des récepteurs tyrosine kinases ErbB, également connu sous les noms d'ErbB1 ou HER1.
• Il se lie aux ligands de la famille EGF, notamment l'EGF, le TGF-alpha, l'amphiréguline (AREG), l'épigène (EPGN), la bétacelluline (BTC), l'épiréguline (EREG) et le facteur de croissance de type EGF liant l'héparine (HBEGF), ce qui entraîne l'homo- ou hétérodimérisation du récepteur et l'autophosphorylation sur des résidus cytoplasmiques clés. (PubMed:10805725, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029) Références associées : PMID:10805725, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Le récepteur phosphorylé recrute des protéines adaptatrices comme GRB2, initiant plusieurs cascades de signalisation en aval, notamment les modules RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 kinase-AKT, PLCgamma-PKC et STAT. Il peut également activer la voie de signalisation NF-kappa-B. (PubMed:27153536, PubMed:11116146) Références associées : PMID:27153536, PMID:11116146
• L'EGFR phosphoryle directement d'autres protéines telles que RGS16 (activant son activité GTPase), MUC1 (améliorant son interaction avec SRC et CTNNB1/bêta-caténine) et CCDC88A/GIV (favorisant la migration cellulaire en retenant l'EGFR à la membrane cellulaire). (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955) Références associées : PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• L'isoforme 2 de l'EGFR peut agir comme antagoniste de l'action de l'EGF.
• L'EGFR se localise dans de multiples compartiments cellulaires : membrane cellulaire, membrane du réticulum endoplasmique, membrane de l'appareil de Golgi, membrane nucléaire, endosomes et noyau ; il peut également être sécrété.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire, et l'isoforme 2 est également détecté dans les cancers de l'ovaire.
• Dans les hépatocytes, l'EGFR agit comme récepteur pour le virus de l'hépatite C (VHC), facilitant l'entrée virale en promouvant la formation du complexe récepteur CD81-CLDN1 et en améliorant la fusion membranaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps cible un épitope du domaine extracellulaire (acides aminés 335-525), ce qui le rend adapté à la détection de l'EGFR de surface cellulaire dans des applications sur cellules vivantes et cellules fixées comme la cytométrie en flux et l'immunofluorescence.
• Pour la cytométrie en flux, nous recommandons de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration optimale et d'inclure des contrôles isotypiques appropriés pour garantir la spécificité.
• Pour l'immunofluorescence, une fixation douce au paraformaldéhyde suivie d'une perméabilisation au Triton X-100 ou au méthanol peut être utilisée ; cependant, la détection de l'EGFR de surface peut ne pas nécessiter de perméabilisation.
• La réactivité croisée n'étant validée que pour l'EGFR humain, les utilisateurs doivent vérifier la réactivité chez d'autres espèces ou types d'échantillons d'intérêt.
• Comme pour tout anticorps recombinant, effectuez des contrôles de cohérence entre lots et validez dans le système d'essai prévu.

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