Anticorps monoclonal de lapin anti-CLEC12A/CD371 humain pour FC - Q5QGZ9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CLEC12A

• CLEC12A (CD371, CLL-1, MICL) est un récepteur transmembranaire de type II à passage unique de la famille des lectines de type C. L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes.
• Il fonctionne comme un récepteur inhibiteur myéloïde ; après la liaison de son ligand, son motif ITIM est phosphorylé, recrutant les tyrosine-protéine phosphatases PTPN6 et PTPN11 pour atténuer les signaux d'activation médiés par SYK, supprimant ainsi les réponses des cellules myéloïdes, notamment la production de cytokines et la dégranulation. Références associées : PMID:14739280, PMID:16239426, PMID:34234773
• Il agit comme un récepteur de reconnaissance de formes pour divers ligands : il reconnaît l'ADN dans les pièges extracellulaires de neutrophiles (NET), les cristaux d'urate monosodique et des molécules associées aux pathogènes telles que l'hémozoïne du plasmodium et l'acide mycolique mycobactérien, ce qui le relie à la rétroaction anti-inflammatoire et à la défense de l'hôte. Références associées : PMID:38367667, PMID:38386511, PMID:39143217, PMID:31269448, PMID:36542980
• Il inhibe la cytotoxicité des cellules natural killer (NK) et limite la maturation des cellules dendritiques de manière dépendante de l'IL-10, contribuant à l'homéostasie immunitaire. Références associées : PMID:15238421, PMID:16239426
• Il se localise principalement sur la membrane cellulaire.
• Il est exprimé préférentiellement dans les tissus lymphoïdes et les cellules immunitaires innées/adaptatives, notamment les cellules NK, les lymphocytes T, les cellules dendritiques, les monocytes et les macrophages ; il est détecté au niveau protéique dans la pulpe rouge riche en macrophages de la rate et dans les ganglions lymphatiques. Références associées : PMID:14739280, PMID:15238421, PMID:15548716, PMID:16239426, PMID:16838277
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée et la phosphorylation ; le domaine extracellulaire contient des ponts disulfures conservés essentiels à l'intégrité structurale.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé correspond au domaine extracellulaire (aa 65-265) de CLEC12A humain, qui contient le domaine de lectine de type C et est suffisant pour générer des anticorps reconnaissant le récepteur natif sur les cellules vivantes.
• Ce conjugué est optimisé pour la cytométrie en flux directe (FC) sans anticorps secondaire ; il est recommandé de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre type de cellule et vos conditions de coloration.
• Pour la coloration de surface de CLEC12A, récoltez les cellules et lavez-les avec un tampon FACS (PBS contenant 1 à 2 % de FBS ou de BSA). Incubez avec l'anticorps conjugué au fluorophore à 2-8 °C pendant 20 à 30 minutes, à l'abri de la lumière.
• Incluez des contrôles d'isotype appropriés et des réactifs de blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique, en particulier dans les populations de cellules myéloïdes.
• L'acquisition des données doit être effectuée dès que possible après la coloration ; si un retard est inévitable, fixez les cellules avec du paraformaldéhyde après lavage et protégez-les de la lumière.
• Évitez les cycles répétés de congélation-décongélation de l'anticorps ; stockez le conjugué non dilué à 2-8 °C et protégez-le d'une exposition prolongée à la lumière.

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