Anticorps monoclonal de lapin anti-humain CEACAM5/CD66e pour FC - P06731

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CEACAM5

• CEACAM5 (Molécule d'adhésion cellulaire antigène carcinoembryonnaire 5), également connue sous le nom de CEA ou CD66e, est une glycoprotéine de surface cellulaire et un membre de la famille de l'antigène carcinoembryonnaire (CEA) codée par le gène CEACAM5 (GeneID : 1048).
• Elle joue un rôle dans l'adhésion cellulaire, en médiant à la fois une liaison homophile et des interactions hétérophiles avec d'autres membres de la famille CEACAM tels que CEACAM6, et contribue aux voies de signalisation intracellulaire qui influencent la progression tumorale. Références associées : PMID:10864933 PMID:10910050 PMID:2803308
• Joue un rôle oncogénique en favorisant la progression tumorale et en induisant une résistance à l'anoïkis (apoptose induite par le détachement) dans les cellules de carcinome colorectal, augmentant le potentiel métastatique. Références associées : PMID:10910050
• En tant que récepteur pour les adhésines Dr d'E. coli, la liaison de CEACAM5 facilite l'attachement bactérien et peut contribuer à la pathogenèse de la diarrhée infectieuse.
• Elle est principalement localisée à la membrane cellulaire apicale et à la surface cellulaire, ce qui correspond à son rôle dans l'adhésion cellulaire et la transduction du signal.
• La protéine est largement glycosylée et attachée à la membrane via une ancre glycosylphosphatidylinositol (GPI) ; elle contient des domaines de type immunoglobuline et des ponts disulfure essentiels à sa structure.
• Son expression est prédominante dans les cellules épithéliales cylindriques et les cellules caliciformes du côlon, et elle est fortement régulée à la hausse dans les adénocarcinomes du système digestif et du côlon fœtal, ce qui en fait un marqueur tumoral bien connu. Références associées : PMID:10436421

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 35-685 du CEACAM5 humain, ce qui englobe l'ensemble du domaine extracellulaire. Ainsi, l'anticorps est susceptible de détecter la conformation native, liée à la membrane, dans les tests de cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux, utilisez un anticorps de contrôle isotypique approprié (IgG de lapin, même fluorophore) pour évaluer la liaison non spécifique.
• Effectuez un titrage de l'anticorps (par exemple, 0,1–10 μg/mL) sur votre lignée cellulaire d'intérêt pour déterminer l'indice de marquage optimal.
• Choisissez une lignée cellulaire avec une expression confirmée de CEACAM5 (par exemple, des cellules d'adénocarcinome colorectal comme HT-29 ou LS174T) comme contrôle positif, et une lignée négative pour CEACAM5 comme contrôle négatif.
• est un équivalent d'Alexa Fluor® 488 brillant et photostable, offrant une flexibilité dans la conception de panels multicolores. Assurez la compensation lors de l'utilisation d'autres fluorophores du canal vert.
• Pour le marquage intracellulaire, envisagez un protocole de fixation et de perméabilisation optimisé pour les protéines de surface cellulaire ancrées par GPI, car une perméabilisation agressive pourrait perturber la localisation membranaire.

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