Anticorps monoclonal de lapin anti-CD99 humain conjugué pour IF/ICC et FC - P14209

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'antigène CD99

• L'antigène CD99 (également connu sous le nom de MIC2, antigène E2, 12E7 ou glycoprotéine de surface des lymphocytes T E2) est une protéine transmembranaire codée par le gène CD99 chez l'homme.
• Il joue un rôle dans les processus d'adhésion des lymphocytes T, y compris la formation spontanée de rosettes avec les érythrocytes, une caractéristique des lymphocytes T.
• Le CD99 joue un rôle essentiel dans l'extravasation des leucocytes, facilitant leur passage à travers la membrane basale endothéliale à une étape tardive, indépendamment de PECAM1.
• La protéine est localisée au niveau de la membrane plasmique (protéine membranaire de type I à passage unique) avec son extrémité N-terminale exposée à l'extérieur de la cellule.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la phosphorylation (mots-clés : Glycoprotéine, Phosphoprotéine).
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et la protéine fait partie du protéome de référence avec des preuves de séquençage protéique direct.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 24-123 du CD99 humain, correspondant à la région extracellulaire N-terminale. Cette conception cible probablement un épitope exposé, adapté aux applications de marquage de cellules vivantes.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), une fixation à la paraformaldéhyde est recommandée, mais la perméabilisation peut être omise si l'épitope est accessible à la surface cellulaire. Testez le marquage avec et sans détergent pour le confirmer.
• En cytométrie en flux (FC), ce conjugué permet une détection directe ; envisagez d'utiliser des contrôles isotypiques appropriés et de titrer l'anticorps pour un rapport signal/bruit optimal.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans votre système expérimental en utilisant des lignées cellulaires positives pour le CD99 (par exemple, des lignées de lymphocytes T) et des contrôles négatifs pour le CD99 afin de confirmer une réactivité croisée minimale.
• Étant donné que le CD99 est impliqué dans l'adhésion, assurez-vous que les méthodes de récolte des cellules n'endommagent pas les antigènes de surface ; des techniques de détachement douces sont conseillées.

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