Anticorps monoclonal de lapin anti-CD97 humain pour cytométrie en flux - P48960

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD97 (ADGRE5)

• CD97, également connu sous le nom d’ADGRE5 ou d’antigène leucocytaire CD97, appartient à la famille des récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) d’adhésion et intervient dans l’adhésion et la signalisation cellulaires.
• Il joue un rôle essentiel dans la migration des leucocytes, en assurant la médiation des événements d’adhésion et de signalisation essentiels au trafic des cellules immunitaires.
• Le récepteur subit un épissage alternatif, produisant des isoformes présentant un nombre variable de domaines de type EGF, ce qui peut moduler les interactions avec les ligands.
• CD97 se localise sur la membrane cellulaire et peut être libéré dans l’espace extracellulaire sous une forme soluble, ce qui est cohérent avec ses fonctions dans l’adhésion et la signalisation.
• Il est largement exprimé sur les cellules hématopoïétiques, notamment les lymphocytes activés, les monocytes, les macrophages, les cellules dendritiques et les granulocytes, et il est également abondant sur les cellules musculaires lisses.
• L’expression de CD97 est augmentée dans des affections inflammatoires telles que la sclérose en plaques et la polyarthrite rhumatoïde, et du CD97 soluble est détectable dans le liquide synovial.
• La protéine contient plusieurs domaines de type EGF, un site de protéolyse du GPCR et une hélice transmembranaire, ainsi que des ponts disulfure et des sites de glycosylation et de phosphorylation.
• En outre, CD97 est exprimé dans divers carcinomes (thyroïdiens, colorectaux, gastriques, œsophagiens et pancréatiques), ce qui suggère un rôle dans la biologie tumorale.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région extracellulaire (acides aminés 21–398) du CD97 humain, ce qui suggère que l’anticorps détecte le récepteur exprimé à la surface cellulaire, et qu’il est idéal pour les applications de cytométrie en flux.
• Pour le marquage en FC, envisagez de titrer l’anticorps (par exemple, 0,1–10 µg/mL) afin d’optimiser le rapport signal/bruit dans votre type cellulaire spécifique, et validez le protocole à l’aide de témoins positifs appropriés (par exemple, des leucocytes activés) et de témoins négatifs.
• Étant donné que CD97 est libéré dans l’espace extracellulaire, sachez que le récepteur soluble présent dans certains échantillons peut entrer en compétition pour la liaison à l’anticorps ; envisagez de laver soigneusement les cellules avant le marquage.
• La réactivité croisée est rapportée uniquement chez l’humain ; vérifiez la réactivité lors de l’utilisation de cellules de primates non humains en raison d’une éventuelle homologie de séquence.
• L’anticorps est conjugué à l’, un fluorophore rouge lointain ; assurez-vous que votre cytomètre en flux dispose du laser et du jeu de filtres appropriés (par exemple, excitation à 633/635 nm et émission à 700–725 nm) pour la détection.
• Incluez des témoins isotypiques appropriés et des marqueurs de viabilité afin de sélectionner les cellules vivantes et individuelles pour une analyse précise.

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