mAb anti-CD97 humain de lapin pour FC - P48960

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD97

• Le récepteur couplé à la protéine G d'adhésion E5 (CD97, ADGRE5) est un membre de la famille des GPCR d'adhésion, caractérisé par un grand domaine extracellulaire avec des répétitions de type EGF et un domaine à sept domaines transmembranaires.
• Cette protéine assure à la fois l'adhésion cellulaire et la signalisation intracellulaire, et intervient principalement au début de l'activation leucocytaire pour réguler la migration.
• Le CD97 joue un rôle essentiel dans la migration des leucocytes, facilitant le trafic des cellules immunitaires vers les sites d'inflammation.
• Il est largement exprimé sur la plupart des cellules hématopoïétiques, notamment les lymphocytes activés, les monocytes, les macrophages, les cellules dendritiques et les granulocytes, et est également abondant sur les cellules du muscle lisse.
• Le récepteur est localisé sur la membrane cellulaire et peut également être libéré sous forme soluble dans l'espace extracellulaire ; son expression est augmentée dans des conditions inflammatoires, comme la sclérose en plaques et la polyarthrite rhumatoïde.
• Le CD97 est exprimé dans divers carcinomes (thyroïdiens, colorectaux, gastriques, oesophagiens, pancréatiques), ce qui suggère des rôles potentiels dans la biologie tumorale.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation et la phosphorylation ; la protéine contient des domaines de type EGF liant le calcium et des ponts disulfures essentiels à sa structure.
• L'épissage alternatif produit des isoformes de poids moléculaires différents ; les masses annotées dans UniProt sont d'environ 92 kDa, ce qui correspond aux formes glycosylées.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène a été conçu à partir de la région extracellulaire (acides aminés 21-398) du CD97 humain, qui englobe les domaines de type EGF et est susceptible de reconnaître le récepteur natif exprimé à la surface en cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux (FC), prévoyez d'utiliser une discrimination vivant/mort appropriée et un blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique, en particulier dans les échantillons à forte expression de FcγR comme les monocytes et les macrophages.
• Validez l'anticorps dans le système d'échantillon approprié (par exemple, les PBMC humains, les lignées cellulaires exprimant le CD97) et incluez des contrôles adaptés pour confirmer la spécificité.
• Comme le CD97 est libéré sous forme soluble, sachez que le CD97 soluble présent dans l'échantillon (par exemple, le sérum, le liquide synovial) pourrait entrer en compétition avec la détection de la forme membranaire ; prévoyez de laver soigneusement les cellules avant la coloration.

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