Anticorps monoclonal Lapin anti-Humain CD94 conjugué pour cytométrie en flux - Q13241

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD94

• Le CD94 (KLRD1) est une glycoprotéine transmembranaire de type II appartenant à la sous-famille D des récepteurs de type lectine des cellules tueuses. Il fonctionne comme une sous-unité de liaison au ligand, formant des hétérodimères liés par des ponts disulfures avec NKG2A (KLRC1) ou NKG2C (KLRC2). Ces complexes récepteurs reconnaissent la molécule de CMH de classe Ib non classique HLA-E sur les cellules cibles, permettant la surveillance immunitaire de l'expression du CMH de classe I. Références connexes : PMID:10023772, PMID:18064301, PMID:18083576, PMID:12387742, PMID:9430220
• Le complexe KLRD1-KLRC1 agit comme un récepteur inhibiteur dominant sur les cellules tueuses naturelles (NK) et un sous-ensemble de cellules T CD8+ mémoires/efféctrices. Lors de la liaison à HLA-E, il recrute les phosphatases tyrosine INPP5D/SHIP-1 et INPPL1/SHIP-2 via des motifs d'inhibition basés sur la tyrosine des récepteurs immunitaires (ITIM) dans KLRC1, contrecarrant les signaux d'activation et maintenant la tolérance au soi. Dans les microenvironnements tumoraux, cette voie contribue à l'épuisement des cellules NK et T. Références connexes : PMID:30860984, PMID:9430220, PMID:9485206, PMID:12387742, PMID:18064301, PMID:30503213, PMID:12165520
• Le complexe KLRD1-KLRC2 fonctionne comme un récepteur activateur, transmettant des signaux via l'adaptateur TYROBP/DAP12. Il joue un rôle dans les réponses NK adaptatives, l'immunité virale et la tolérance materno-fœtale en reconnaissant HLA-E chargé de peptides dérivés de HLA-G ou d'antigènes viraux. Références connexes : PMID:15940674, PMID:9655483, PMID:30134159, PMID:9754572, PMID:20952657, PMID:21825173
• Les récepteurs CD94 sont détournés par les virus pour échapper au système immunitaire : le cytomégalovirus humain stabilise HLA-E avec des peptides viraux pour inhiber les cellules NK ; le VIH-1 utilise un peptide dérivé de la p24 (AISPRTLNA) dans le même but ; et le peptide S1 de la protéine spike du SARS-CoV-2 (LQPRTFLL) induit l'épuisement des cellules NK et CD8+ T via la reconnaissance de HLA-E. Références connexes : PMID:32859121
• Le CD94 est exprimé sur la membrane cellulaire de sous-ensembles de cellules NK, de cellules T αβ CD8+ mémoires/efféctrices, de cellules T γδ cytotoxiques et de clones de cellules T spécifiques au mélanome. KLRD1-KLRC1 et KLRD1-KLRC2 sont différentiellement distribués, avec peu de cellules co-exprimant les deux complexes. Références connexes : PMID:21825173, PMID:9430220, PMID:9485206, PMID:12387742, PMID:20952657
• Structurellement, le CD94 contient un domaine de type lectine C, une ancre de signal et une seule hélice transmembranaire. Il est modifié post-traductionnellement par une N-glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui sont essentiels pour un repliement et une dimérisation corrects. Son poids moléculaire est d'environ 21 kDa.

Conseils expérimentaux et techniques

• est un fluorophore brillant avec des maxima d'excitation/émission adaptés aux lasers bleu (488 nm) ou rouge (633 nm) ; vérifiez la compatibilité avec la configuration de votre cytomètre en flux et les paramètres de compensation.
• En tant que conjugué direct, l'anticorps ne nécessite pas de marquage secondaire. Effectuez un titrage pour déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire et vos conditions expérimentales.
• Validez dans un système connu exprimant le CD94, tel que la lignée cellulaire NK NKL ou des cellules NK humaines fraîchement isolées. Incluez à la fois des témoins positifs (par exemple, cellules NK activées par IL-2) et négatifs (par exemple, lignées cellulaires CD94–).
• L'expression du CD94 peut varier en fonction de l'état d'activation cellulaire ; envisagez des expériences en fonction du temps ou de stimulation pour capturer les changements dynamiques.
• Pour les panneaux multicolores, vérifiez le chevauchement spectral avec d'autres fluorophores et utilisez des témoins de compensation appropriés.

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