Anticorps monoclonal de lapin anti-humain CD84 conjugué à pour IF/ICC et FC - Q9UIB8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD84

• Le CD84 (SLAMF5) est un membre de la famille des récepteurs SLAM, qui modulent les réponses immunitaires innées et adaptatives via des interactions cellulaires homo- ou hétérotypiques.
• Il fonctionne comme un récepteur à ligand propre, et sa signalisation est régulée par la présence des petites protéines adaptatrices cytoplasmiques SH2D1A/SAP et SH2D1B/EAT-2.
• Les interactions homophiles du CD84 augmentent la sécrétion d'interféron gamma (IFNG) dans les lymphocytes et induisent la stimulation des plaquettes via une voie dépendante de SH2D1A.
• Le CD84 médie la cytotoxicité des cellules tueuses naturelles (NK), dépendante de SH2D1A et SH2D1B (Par similitude).
• Il sert de marqueur pour les cellules progénitrices hématopoïétiques. Références associées : PMID:11564780, PMID:12115647, PMID:12928397
• Dans les mastocytes, le CD84 régule négativement la signalisation du récepteur à haute affinité des immunoglobulines epsilon, indépendamment de SH2D1A et SH2D1B, impliquant FES et PTPN6/SHP-1. Références associées : PMID:22068234
• Le CD84 régule positivement la macroautophagie dans les cellules dendritiques primaires en stabilisant IRF8, inhibant sa dégradation protéasomique médiée par TRIM21. Références associées : PMID:29434592
• Localisation subcellulaire : Le CD84 est une protéine membranaire exprimée principalement dans les tissus hématopoïétiques, y compris les ganglions lymphatiques, la rate, les leucocytes périphériques, les macrophages, les cellules B, les monocytes, les plaquettes, les thymocytes, les cellules T et les cellules dendritiques.
• La protéine subit un épissage alternatif, conduisant à de multiples isoformes avec des poids moléculaires prédits autour de 24-38 kDa. C'est une glycoprotéine avec des ponts disulfure et des sites de phosphorylation.

Guide expérimental et conseils techniques

• Utilisez directement pour la cytométrie en flux (FC) ou l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC) sans anticorps secondaire, car l'anticorps est pré-conjugué à .
• Titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre configuration expérimentale spécifique ; les dilutions de départ typiques pour la FC sont de 1:50 à 1:200, mais confirmez empiriquement.
• Pour la FC, incluez un contrôle isotypique approprié (IgG1 de lapin conjugué à ) pour évaluer la liaison non spécifique.
• Pour l'IF/ICC, une fixation avec du paraformaldéhyde à 4% est recommandée ; la perméabilisation peut ne pas être nécessaire pour le CD84 de surface cellulaire, mais testez si une coloration intracellulaire est souhaitée.
• Validez l'anticorps dans des lignées cellulaires hématopoïétiques humaines ou des cellules immunitaires primaires connues pour exprimer le CD84 (par exemple, Raji, THP-1, ou PBMC).
• Comme l'anticorps détecte de multiples isoformes, notez que l'intensité de coloration peut varier selon les types cellulaires en raison d'une expression différentielle des isoformes.
• Évitez les cycles répétés de congélation-décongélation ; conservez à 4°C à l'abri de la lumière.

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