Anticorps monoclonal de lapin anti-humain CD81 conjugué pour cytométrie en flux - P60033

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD81

• CD81 (Cible de l'anticorps antiprolifératif 1, TAPA-1, Tétraspanine-28) est une protéine de surface cellulaire de 26 kDa et un membre de la superfamille des tétraspanines, caractérisée par quatre domaines transmembranaires et des rôles essentiels dans l'organisation des microdomaines membranaires.
• Il agit comme un composant structurel des microdomaines enrichis en tétraspanines (TERM), essentiels pour l'assemblage du complexe du récepteur des lymphocytes B et l'abaissement du seuil antigénique pour l'expansion clonale et la production d'anticorps. Dans les lymphocytes B, CD81 facilite le trafic et la compartimentation de CD19, permettant la formation des complexes CD19-CR2/CD21-BCR au sein des TERM de signalisation. Références associées : PMID:16449649, PMID:20237408, PMID:27881302, PMID:15161911
• Dans les lymphocytes T, CD81 localise CD247/CD3 zêta aux synapses induites par l'antigène avec les lymphocytes B, fournissant une costimulation et favorisant la polarisation vers un phénotype de lymphocyte T auxiliaire de type 2. Références associées : PMID:22307619, PMID:23858057, PMID:8766544
• CD81 est présent dans les compartiments de classe II du CMH, suggérant un rôle modulateur dans la présentation de l'antigène. Références associées : PMID:8409388, PMID:8766544
• En tant que régulateur de la fusion cellulaire, CD81 inhibe la fusion des macrophages en cellules géantes multinucléées et est impliqué dans la fusion spermatozoïde-ovocyte et la fusion des myoblastes. Références associées : PMID:12796480
• CD81 est exploité par de multiples agents pathogènes : c'est un récepteur pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC) dans les hépatocytes, il soutient la réplication précoce du VIH-1 dans les lymphocytes T en favorisant la dégradation de SAMHD1, et il est spécifiquement requis pour l'infectivité des sporozoïtes de Plasmodium falciparum envers les hépatocytes. Références associées : PMID:28871089
• Au niveau subcellulaire, CD81 se localise à la membrane cellulaire et à la membrane cellulaire basolatérale, avec une expression tissulaire principalement sur les lymphocytes B, les hépatocytes, les monocytes/macrophages, et les lymphocytes T CD4-positifs naïfs et mémoire. Références associées : PMID:20237408, PMID:12483205, PMID:12796480, PMID:22307619

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 114–199 du CD81 humain, situés dans la grande boucle extracellulaire (LEL), une région cruciale pour les interactions protéine-protéine et la liaison virale. Cette conception peut améliorer la reconnaissance du CD81 natif.
• Ce conjugué est destiné à la cytométrie en flux directe. Inclure des contrôles isotypes appropriés et effectuer un titrage des anticorps pour déterminer la concentration de marquage optimale.
• Pour la détection de CD81, envisagez d'utiliser des PBMC humains, des lignées de lymphocytes B (par exemple, Raji) ou des lignées cellulaires dérivées d'hépatocytes, car CD81 est exprimé sur les lymphocytes B, les lymphocytes T et les hépatocytes.
• Dans les panels de cytométrie en flux multicolores, assurez la compatibilité spectrale d'avec les autres fluorophores et incorporez un colorant de viabilité pour exclure les cellules mortes.
• Validez les performances de l'anticorps dans votre contexte expérimental spécifique, y compris les étapes de fixation et de perméabilisation si un marquage intracellulaire est envisagé.

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