AcM de lapin anti-humain CD80/B7-1 pour la cytométrie en flux - P33681

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD80/B7-1

• CD80, également connu sous le nom de B7-1, est un antigène d’activation des lymphocytes T et une molécule costimulatrice appartenant à la superfamille des immunoglobulines, essentielle à l’amorçage des lymphocytes T. Il fournit le principal signal auxiliaire renforçant le signal du CMH/TCR dans les lymphocytes T naïfs en se liant au récepteur CD28.
  Références associées :
  PMID:38467718
  PMID:12196291

• La liaison de CD80 à CD28 active des voies de signalisation en aval, notamment les cascades NF‑κB et MAPK, entraînant la production de cytokines telles que l’IL‑2.
  Références associées :
  PMID:10438913

• CD80 peut également agir comme un inhibiteur de l’activation des lymphocytes T en servant de ligand à CTLA4, un récepteur leurre qui entre en compétition avec CD28 et bloque l’amorçage des lymphocytes T.
  Références associées :
  PMID:10583602
  PMID:11279502

• Le signal costimulateur CD28/CD80 favorise le métabolisme du glucose et la synthèse d’ATP des lymphocytes T par l’activation de la voie PI3K/Akt.
  Références associées :
  PMID:12121659

• CD80 régule les interactions PD‑L1/PD‑1, limitant la liaison excessive de PD‑L1 et son impact inhibiteur sur les réponses immunitaires.
  Références associées :
  PMID:36727298

• Dans les lymphocytes B, CD80 est essentiel à la régulation des interactions entre lymphocytes B et T au cours des réponses précoces et tardives des centres germinatifs, nécessaires à une immunité humorale efficace. (Par analogie)

• CD80 est localisé sur la membrane cellulaire et est exprimé à la surface des cellules présentatrices d’antigène (CPA), notamment les cellules dendritiques, les macrophages et les lymphocytes B activés.

• La protéine subit un épissage alternatif et des modifications post-traductionnelles telles que la glycosylation et la palmitoylation. Elle sert également de récepteur à l’adénovirus du sous-groupe B lors d’une infection microbienne.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps monoclonal de lapin conjugué à est conçu pour la cytométrie en flux (FC). Réalisez des expériences de titrage afin de déterminer la concentration de travail optimale pour votre type d’échantillon spécifique.
• CD80 est exprimé à la surface des cellules présentatrices d’antigène ; utilisez des lignées cellulaires humaines pertinentes (p. ex. Raji, THP-1) ou des cellules primaires (p. ex. cellules mononucléées du sang périphérique, cellules dendritiques) comme contrôles positifs.
• est un fluorophore rouge lointain excitable à environ 650 nm, avec une émission proche de 665 nm. Assurez-vous d’appliquer une compensation appropriée, en particulier dans les panels multicolores, et évitez les combinaisons de fluorophores présentant un chevauchement spectral important.
• Incluez des contrôles isotopiques appropriés et des colorants de viabilité afin d’exclure les cellules mortes et de réduire au minimum la liaison non spécifique.
• Pour le marquage intracellulaire (p. ex. après un traitement à la bréfeldine A), fixez et perméabilisez les cellules avant l’incubation avec l’anticorps, et vérifiez que l’épitope reste intact.
• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 35‑242) ; par conséquent, l’anticorps convient au marquage de cellules vivantes non perméabilisées. Évitez une fixation agressive susceptible d’altérer la reconnaissance de l’épitope.

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