Anticorps monoclonal de lapin anti-CD68 humain conjugué à pour la cytométrie en flux (intracellulaire) - P34810

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD68 (Macrosialine)

• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes du CD68. Le CD68 est une protéine transmembranaire fortement glycosylée appartenant à la famille des glycoprotéines membranaires associées aux lysosomes/endosomes (LAMP).
• Le CD68 joue un rôle clé dans les activités phagocytaires des macrophages tissulaires, à la fois dans le métabolisme lysosomal intracellulaire et dans les interactions extracellulaires cellule-cellule et cellule-pathogène.
• Il se lie à des lectines ou sélectines spécifiques des tissus et des organes, facilitant le recrutement de sous-populations de macrophages vers des tissus particuliers.
• La recirculation rapide du CD68 des endosomes et lysosomes vers la membrane plasmique peut permettre aux macrophages de migrer sur des substrats ou d'autres cellules porteurs de sélectines.
• Au niveau subcellulaire, le CD68 se localise principalement sur les membranes des endosomes et des lysosomes, mais peut également être trouvé sur la membrane cellulaire.
• Il est fortement exprimé dans les monocytes sanguins et les macrophages tissulaires, et est également détecté dans les lymphocytes, les fibroblastes, les cellules endothéliales et de nombreuses lignées cellulaires tumorales, où il peut favoriser la dissémination.
• La protéine contient un peptide signal, un domaine transmembranaire et plusieurs ponts disulfure, et subit une glycosylation de type N.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Étant donné que le CD68 est principalement localisé dans les compartiments lysosomaux et endosomaux intracellulaires, effectuez les étapes appropriées de fixation et de perméabilisation avant la coloration pour la cytométrie en flux intracellulaire.
• Validez les performances de l'anticorps dans des systèmes modèles de macrophages pertinents, tels que les macrophages dérivés de THP-1 ou les monocytes humains primaires.
• Le fluorophore a une excitation/émission similaire au Pacific Blue, assurez-vous donc que votre cytomètre en flux est configuré avec un laser violet (par exemple, 405 nm) et des filtres de détection appropriés (par exemple, 450/50 BP).
• Cet anticorps a été produit contre le domaine extracellulaire/luminal (aa 22-319) du CD68 humain, ce qui peut cibler à la fois les pools de protéines de surface et intracellulaires.

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