Anticorps monoclonal de lapin anti-CD66b humain pour cytométrie en flux - P31997

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD66b (CEACAM8)

• CD66b (CEACAM8) est une protéine membranaire de type I à passage unique et un membre de la famille des antigènes carcinoembryonnaires (CEA), également désignée CD67, CGM6 et NCA-95.
• Agit comme une molécule d’adhésion cellulaire indépendante du calcium, en médiant des interactions hétérophiles avec d’autres membres de la famille des CEACAM, tels que CEACAM6 (PubMed:11590190, PubMed:2022629, PubMed:8776764). Références associées : PMID:11590190, PMID:2022629, PMID:8776764
• L’adhésion hétérophile entre les molécules de CEACAM8 se produit spécifiquement sur les neutrophiles activés, contribuant à la dynamique des interactions entre les cellules immunitaires (PubMed:8776764). Références associées : PMID:8776764
• Localisée dans la membrane cellulaire et ancrée par l’intermédiaire d’un groupement glycosylphosphatidylinositol (GPI) ; contient des domaines de type immunoglobuline.
• Exprimée principalement dans les leucocytes de patients atteints de leucémie myéloïde chronique et dans la moelle osseuse, ce qui est cohérent avec un marqueur de lignée granulocytaire.
• La protéine mature a un poids moléculaire prédit d’environ 38 kDa et subit une glycosylation liée à l’azote ainsi que la formation de ponts disulfure.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Le conjugué ABflo® 488 permet une détection directe par cytométrie en flux ; aucun anticorps secondaire n’est requis. Optimisez la dilution de l’anticorps (par exemple, 0,5 à 5 µg pour 10⁶ cellules) à l’aide de lignées cellulaires positives et négatives connues ou de neutrophiles humains primaires.
• Pour le marquage de surface, utilisez des cellules vivantes non fixées afin de préserver l’intégrité de l’épitope ; si une fixation est nécessaire, vérifiez que le protocole choisi n’altère pas la reconnaissance de CD66b.
• Incluez des contrôles isotypiques appropriés ainsi que des contrôles fluorescence-minus-one (FMO) afin d’évaluer le bruit de fond et de définir précisément les seuils.
• Non validé pour d’autres applications telles que l’IHC, l’ICC, le WB ou l’ELISA ; les utilisateurs doivent réaliser des essais préliminaires approfondis en cas d’adaptation à ces plateformes.

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