Anticorps monoclonal de lapin anti-CD62E/E-sélectine humaine pour cytométrie en flux - P16581

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’E-sélectine

• L’E-sélectine (CD62E) est une glycoprotéine de surface cellulaire appartenant à la famille des molécules d’adhésion de type sélectine, codée chez l’humain par le gène SELE. Elle est également connue sous les noms de molécule d’adhésion des leucocytes endothéliaux 1 (ELAM-1) et de molécule d’adhésion leucocyte-cellule endothéliale 2 (LECAM2).
• Sa fonction principale est de favoriser l’adhésion des neutrophiles sanguins à l’endothélium activé par les cytokines, une étape essentielle de la réponse inflammatoire. Cette interaction s’effectue par la liaison à SELPLG/PSGL1 (ligand 1 de la glycoprotéine P-sélectine).
• De plus, l’E-sélectine pourrait contribuer à la morphogenèse capillaire, ce qui suggère un rôle dépassant l’adhésion immunitaire dans l’angiogenèse ou le développement vasculaire.
• La protéine est localisée dans la membrane cellulaire en tant que protéine transmembranaire de type I, avec une région extracellulaire contenant un domaine de type lectine C en position N-terminale, un domaine de type EGF et plusieurs répétitions sushi (CCP/SCR).
• L’E-sélectine se caractérise par plusieurs motifs structuraux essentiels, notamment des sites de liaison au calcium, des ponts disulfure et une glycosylation liée à l’azote. Elle nécessite des ions métalliques, en particulier le calcium, pour reconnaître ses ligands.
• L’expression de l’E-sélectine est généralement induite dans les cellules endothéliales par des cytokines inflammatoires telles que le TNF-alpha et l’IL-1. Elle n’est pas exprimée de manière constitutive dans la plupart des tissus, ce qui souligne son rôle dans l’inflammation aiguë.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 22–230) de l’E-sélectine humaine, englobant les domaines lectine et de type EGF. Cela suggère que l’anticorps cible probablement la région de liaison au ligand en position N-terminale, ce qui le rend adapté au blocage ou à la détection de l’E-sélectine exprimée à la surface cellulaire.
• En tant qu’anticorps monoclonal conjugué à un fluorophore, ce réactif est prêt à l’emploi pour la cytométrie en flux directe, sans marquage secondaire. Il est conseillé de titrer l’anticorps afin de déterminer la concentration de travail optimale pour votre système cellulaire spécifique.
• L’expression de l’E-sélectine est inductible ; envisagez de stimuler les cellules endothéliales (par exemple, les HUVEC) avec du TNF-α ou de l’IL-1 pendant 4 à 6 heures avant le marquage afin d’obtenir des niveaux de surface détectables.
• Incluez des contrôles d’isotype appropriés et des colorants de viabilité afin de distinguer la liaison spécifique et d’exclure les cellules mortes de l’analyse.
• Conservez l’anticorps entre 2 et 8 °C, à l’abri de la lumière ; évitez les cycles répétés de congélation-décongélation.

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