Anticorps monoclonal de lapin anti-CD61 humain conjugué pour la cytométrie en flux - P05106

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'intégrine bêta-3 (CD61)

• L'intégrine bêta-3 (CD61, GPIIIa) est codée par le gène ITGB3 et exprimée sous forme de glycoprotéine transmembranaire de type I. L'épissage alternatif produit l'isoforme bêta-3A (largement exprimée, y compris dans les plaquettes et les ostéoblastes) et l'isoforme bêta-3C (spécifique à la prostate et aux testicules).
• Elle forme deux hétérodimères majeurs : l'αIIbβ3 (ITGA2B:ITGB3) spécifique aux plaquettes, qui médie l'agrégation plaquettaire en se liant au fibrinogène après activation, et l'αVβ3 (ITGAV:ITGB3) largement exprimé, qui agit comme un récepteur pour la vitronectine, la fibronectine, l'ostéopontine et d'autres protéines de la matrice extracellulaire.
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• L'intégrine αVβ3 transmet des signaux provenant de facteurs de croissance (FGF1, FGF2, IGF1, IGF2, IL1B) et de protéines de la matrice, régulant l'angiogenèse, la migration cellulaire et la survie.
  Références associées : PMID:18441324, PMID:28302677, PMID:19578119, PMID:28873464, PMID:29030430
• Dans le système nerveux central, l'intégrine bêta-3 module la force synaptique en régulant la localisation du transporteur de sérotonine et l'endocytose des récepteurs AMPA (Par similarité).
• ITGAV:ITGB3 fonctionne comme un récepteur d'entrée pour plusieurs virus, dont le virus de l'herpès humain 8, le coxsackievirus A9, le virus Hantaan, le cytomégalovirus, le métapneumovirus humain, le parechovirus humain 1 et le virus du Nil occidental ; la protéine Tat du VIH-1 interagit également avec αVβ3 pour promouvoir l'angiogenèse dans le sarcome de Kaposi.
• Au niveau subcellulaire, l'intégrine bêta-3 se localise à la membrane cellulaire, à la membrane des lamellipodes, aux adhésions focales et aux membranes postsynaptiques, reflétant ses rôles dans l'adhésion, la migration et l'organisation synaptique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent des ponts disulfure, de multiples sites de N-glycosylation et une phosphorylation ; elle se lie aux ions calcium et magnésium essentiels à son activité de liaison aux ligands.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été généré contre une protéine recombinante couvrant les acides aminés 21–718 du CD61 humain, ce qui englobe l'intégralité du domaine extracellulaire. Il est censé reconnaître l'intégrine bêta-3 native à la surface cellulaire.
• La conjugaison directe permet une coloration en une étape sans anticorps secondaires ; incluez donc des contrôles isotypiques appropriés et des étapes de blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique et vos conditions expérimentales ; les dilutions de départ typiques vont de 1:25 à 1:200, mais les performances réelles doivent être validées empiriquement.
• Les protocoles de fixation et de perméabilisation doivent être testés, car ils peuvent modifier l'accessibilité de l'épitope. La coloration de surface de cellules vivantes non fixées est recommandée pour une sensibilité maximale.
• L'expression de l'intégrine bêta-3 peut être régulée à la hausse lors de l'activation plaquettaire ; prenez en compte les conditions de repos par rapport aux conditions activées dans votre conception expérimentale.

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