Anticorps monoclonal de lapin anti-humain CD59 conjugué pour la cytométrie en flux - P13987

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD59

• Le CD59, également connu sous le nom de protectine, protéine inhibitrice du complexe d'attaque membranaire (MAC-IP), inhibiteur membranaire de la lyse réactive (MIRL) et HRF-20, est une glycoprotéine ancrée par GPI exprimée sur les cellules humaines.
• Il agit comme un puissant inhibiteur du complexe d'attaque membranaire (MAC) du complément, empêchant les dommages aux cellules hôtes en bloquant l'incorporation de multiples molécules de C9 dans le pore (PubMed:11882685, PubMed:1698710, PubMed:2475111, PubMed:36797260).
• Références associées : PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Une forme soluble du CD59 est trouvée dans l'urine, qui conserve l'activité de liaison au complément mais a une capacité significativement réduite à inhiber l'assemblage du MAC sur les membranes cellulaires.
• Le CD59 est localisé sur la membrane cellulaire via une ancre glycosylphosphatidylinositol (GPI) ; il est également sécrété.
• Des mutations dans le gène CD59 sont liées à l'anémie hémolytique héréditaire, soulignant son rôle essentiel dans la protection des érythrocytes contre la lyse médiée par le complément.
• La protéine subit un épissage alternatif et des modifications post-traductionnelles incluant la formation de ponts disulfure, la glycation et l'ajout de l'ancre GPI.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé correspond aux acides aminés 26-101 du CD59 humain, une région critique pour son interaction avec les composants du complément C8 et C9. Envisagez d'utiliser des cellules vivantes intactes pour la coloration de surface en raison de l'ancre GPI extracellulaire.
• Pour la cytométrie en flux, les concentrations optimales d'anticorps doivent être déterminées empiriquement. Une gamme de dilution de départ suggérée est de 1:50 à 1:200. Incluez des contrôles isotypiques appropriés et des contrôles de compensation lors de l'utilisation de plusieurs fluorophores.
• Cet anticorps est conjugué à l', qui est excité par le laser violet 405 nm et détecté avec un filtre passe-bande 450/50 nm. Assurez-vous que la configuration de votre cytomètre est compatible.

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