Anticorps monoclonal de lapin anti-CD370/CLEC9A humain pour cytométrie en flux - Q6UXN8

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD370/CLEC9A

• Identité de la protéine et alias : CD370, également connu sous le nom de membre A de la famille 9 du domaine des lectines de type C (CLEC9A), DNGR-1 et UNQ9341, est codé par le gène CLEC9A chez l'être humain.
• Fonction principale en tant que récepteur endocytaire : CLEC9A agit comme un récepteur endocytaire sur un petit sous-ensemble de cellules myéloïdes, spécialisé dans l'absorption et le traitement du matériel provenant de cellules mortes. Il assure la présentation croisée des antigènes associés aux cellules mortes de manière dépendante de Syk.
• Mécanisme de reconnaissance du ligand : Le récepteur reconnaît la forme filamentaire de l'actine (F-actine) en association avec certains domaines de liaison à l'actine des protéines du cytosquelette, notamment la spectrine, qui deviennent exposés lors de dommages à la membrane cellulaire.
• Expression tissulaire et cellulaire : Son expression est fortement restreinte dans le sang périphérique à la surface des cellules dendritiques BDCA3+ et d'un petit sous-ensemble de monocytes CD14+ et CD16−.
• Localisation subcellulaire : CLEC9A est une protéine membranaire, ce qui est cohérent avec son rôle de récepteur de surface cellulaire. Elle contient une hélice transmembranaire à passage unique et une séquence d'ancrage-signal, ce qui la classe comme une protéine membranaire de type II.
• Caractéristiques structurales et fonctionnelles : La protéine appartient à la famille des lectines de type C et contient des ponts disulfure ainsi que des sites de glycosylation liés à l'azote, caractéristiques des récepteurs membranaires impliqués dans l'endocytose. Son poids moléculaire est d'environ 27 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène englobe les acides aminés 110–241 du domaine extracellulaire (NP_997228.1), qui contient le domaine de reconnaissance des glucides. Cette région est probablement accessible sur les cellules vivantes, ce qui permet son utilisation en cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps afin de déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique. Incluez un contrôle isotypique approprié et envisagez d'utiliser un réactif de blocage des récepteurs Fc afin de réduire les liaisons non spécifiques.
• Comme CLEC9A est un récepteur endocytaire, la liaison de l'anticorps peut déclencher son internalisation. Pour réduire au minimum cette internalisation potentielle, effectuez les étapes de marquage à 4 °C en présence d'azoture de sodium si cela est possible.
• Validez l'anticorps sur un échantillon positif connu, tel que des cellules dendritiques BDCA3+ ou des monocytes CD14+, afin de confirmer sa spécificité. Son profil d'expression restreint en fait un marqueur utile pour les études d'immunophénotypage.

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