anticorps monoclonal de lapin anti-humain CD355/CRTAM pour cytométrie en flux - O95727

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CRTAM

• CRTAM (CD355) est une glycoprotéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines, caractérisée par deux domaines extracellulaires de type Ig et une queue cytoplasmique impliquée dans la signalisation.
• Médiatise l’adhésion hétérophilique cellule-cellule et joue un rôle essentiel dans la régulation de l’activation, de la différenciation et de la rétention tissulaire de diverses sous-populations de lymphocytes T (par analogie).
• L’interaction avec CADM1 favorise la cytotoxicité des cellules tueuses naturelles (NK) et la sécrétion d’interféron gamma (IFNG) par les lymphocytes T CD8+ in vitro, et contribue au rejet, médié par les cellules NK, des tumeurs exprimant CADM1 in vivo. Références associées : PMID:15811952
• Régule la prolifération des lymphocytes T CD8+ lors de l’activation du TCR et favorise la polarisation cellulaire des lymphocytes T CD4+ par interaction avec SCRIB, influençant la production de cytokines (IFNG, IL17, IL22) (par analogie).
• Est nécessaire à la rétention intestinale des lymphocytes T intraépithéliaux CD4+ CD8+ et CD8+ ; l’interaction avec CADM1 sur les cellules dendritiques CD103+ facilite le tropisme intestinal et la conversion des lymphocytes T (par analogie).
• Est principalement exprimé sur les lymphocytes T activés restreints par le CMH de classe I (NKT, CD8+), ainsi que dans la rate, le thymus, l’intestin grêle et les neurones de Purkinje ; des niveaux plus faibles sont observés dans les testicules, les ovaires, le côlon et les poumons.
• Les principales modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la formation de ponts disulfure. L’épissage alternatif produit des isoformes dont les poids moléculaires prédits sont d’environ 22 kDa et 44 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps est directement conjugué à et validé pour la cytométrie en flux (FC). Effectuez une titration de l’anticorps afin de déterminer la concentration de marquage optimale pour votre type cellulaire et vos conditions expérimentales spécifiques.
• L’immunogène correspond à la région extracellulaire (aa 18-287), qui peut reconnaître les isoformes complètes et solubles si elles sont présentes. Validez la détection des bandes cibles à environ 22 kDa et/ou 44 kDa dans votre système d’échantillon, en tenant compte des éventuels produits de glycosylation ou de clivage.
• Incluez des contrôles isotopiques et des contrôles « fluorescence moins un » (FMO) appropriés afin de garantir la spécificité. Envisagez d’utiliser comme contrôles positifs des cellules connues pour exprimer CRTAM (par exemple, des lymphocytes T CD8+ activés).
• Pour des résultats optimaux, utilisez des cellules fraîches ou correctement cryoconservées ; évitez les méthodes de fixation susceptibles de masquer l’épitope.

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