Anticorps monoclonal Lapin anti-humain CD335/NKp46 pour IF/ICC et FC - O76036

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur 1 de déclenchement de la cytotoxicité naturelle (CD335/NKp46)

• Cette protéine est un récepteur de déclenchement de la cytotoxicité naturelle (NCR1), également connu sous le nom de CD335, LY94 ou NKp46. Elle appartient à la superfamille des immunoglobulines et existe sous plusieurs isoformes du fait de l'épissage alternatif.
• Il agit comme un récepteur activateur de la cytotoxicité qui améliore la capacité des cellules tueuses naturelles (NK) activées à lyser les cellules tumorales.
• CD335/NKp46 est exprimé sélectivement sur les cellules NK au repos comme activées, et constitue un marqueur spécifique pour l'identification des cellules NK.
• Ce récepteur est une glycoprotéine transmembranaire de type I localisée sur la membrane cellulaire, dont la région extracellulaire comporte deux domaines de type immunoglobuline.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la N-glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui contribuent à sa stabilité structurelle.
• Le gène NCR1 est localisé sur le chromosome 19 humain et code pour une protéine dont le poids moléculaire prédit est d'environ 34,5 kDa ; les bandes observées peuvent cependant varier du fait de la glycosylation (intervalle 21-34 kDa).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend le domaine extracellulaire (acides aminés 22-254) de CD335/NKp46 humain, qui est exposé à la surface cellulaire ; cette conception est adaptée pour détecter le récepteur natif.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), envisagez d'utiliser des préparations cellulaires fixées à l'acétone ou au paraformaldéhyde, et incluez un contrôle négatif sans anticorps primaire pour évaluer le bruit de fond.
• Pour la cytométrie en flux (FC), la conjugaison directe avec l'élimine le besoin d'un anticorps secondaire ; assurez-vous que le fluorophore est compatible avec les configurations de laser et de filtre de votre instrument (excitation/émission similaire à l'Alexa Fluor 594).
• Utilisez des cellules exprimant la cible ou des lignées de cellules NK comme contrôles positifs ; les PBMC humains fraîchement isolés peuvent servir de source de cellules NK exprimant endogéniquement CD335/NKp46.
• En raison de l'hétérogénéité de la glycosylation, plusieurs bandes peuvent apparaître en western blot ; si vous tentez un WB, notez que l'épitope peut être dénaturé par les conditions réductrices et d'ébullition.

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