mAb de lapin anti-CD33 humaine pour FC - P20138

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD33

• Le CD33, également appelé Siglec-3 (lectine de type immunoglobuline liant l'acide sialique 3) ou p67, est un récepteur transmembranaire appartenant à la superfamille des immunoglobulines et à la famille des Siglecs, les lectines liant l'acide sialique. Il est principalement exprimé sur les cellules de la lignée myéloïde.
• Le CD33 se lie préférentiellement aux glycanes porteurs d'acide sialique liés en alpha-2,3 et alpha-2,6, médiant les interactions intercellulaires et maintenant les cellules immunitaires à l'état de repos. La liaison du ligand déclenche la phosphorylation de ses motifs inhibiteurs à base de tyrosine (ITIM) cytoplasmiques par des kinases de type Src comme la LCK, créant des sites de fixation pour les protéines tyrosine phosphatases SHP-1 et SHP-2. Ces phosphatases déphosphorylent ensuite les molécules de signalisation en aval pour supprimer l'activation cellulaire. Références associées : PMID:7718872, PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798, PMID:10611343, PMID:11320212
• La fonction inhibitrice du CD33 sur l'activation des monocytes nécessite l'activité de la phosphoinositide 3-kinase (PI3K). Références associées : PMID:15597323
• Le CD33 est localisé sur la membrane cellulaire et dans les peroxysomes, comme l'ont montré des études de fractionnement subcellulaire et d'immunofluorescence.
• La protéine est principalement exprimée sur les cellules de la lignée monocytaire/myéloïde ; dans le cerveau, elle est exprimée majoritairement sur les cellules microgliales, où elle est impliquée dans les maladies neurodégénératives.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l'azote, la formation de ponts disulfures et la phosphorylation des résidus tyrosine des ITIM. L'épissage alternatif génère de multiples isoformes.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 18-259) du CD33 humain. Cette région est exposée à la surface cellulaire, ce qui rend l'anticorps adapté à la cytométrie en flux sur cellules vivantes sans perméabilisation.
• L'est un colorant fluorescent vert avec des maxima d'excitation/émission d'environ 491/516 nm, compatible avec le canal FITC de la plupart des cytomètres en flux. Assurez-vous d'effectuer une compensation correcte si vous l'utilisez dans des panneaux multicolores.
• Pour un marquage optimal, titrez l'anticorps afin de déterminer la concentration de travail adaptée à votre système expérimental spécifique. Incluez un contrôle isotypique approprié et des contrôles fluorescence moins un (FMO) pour définir les seuils de tri.
• Étant donné que les niveaux d'expression du CD33 peuvent varier selon le type cellulaire et l'état d'activation, validez l'anticorps dans votre matrice d'échantillon (par exemple, cellules mononucléées du sang périphérique, moelle osseuse ou lignées cellulaires).

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