Anticorps monoclonal lapin anti-CD326/EPCAM humain pour IF/ICC et FC - P16422

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la molécule d'adhésion cellulaire épithéliale (EpCAM)

• L'EpCAM est une glycoprotéine transmembranaire de type I qui fonctionne comme une molécule d'adhésion cellulaire homophile, médiant les interactions physiques entre les cellules épithéliales intestinales (CEI) et les lymphocytes intraépithéliaux (LIE) pour maintenir la barrière immunitaire muqueuse.
• Elle joue un rôle essentiel dans la prolifération et la différenciation des cellules souches embryonnaires, ses niveaux d'expression diminuant rapidement lors de la différenciation.
• L'EpCAM régule à la hausse l'expression de FABP5, MYC et des cyclines A et E, ce qui l'associe à la régulation du cycle cellulaire et au contrôle de la croissance.
• La protéine est localisée sur la membrane cellulaire latérale et les jonctions serrées, ce qui est cohérent avec son rôle dans l'adhésion cellulaire et l'intégrité épithéliale.
• Spécificité tissulaire : Elle est fortement et sélectivement exprimée dans les cellules souches embryonnaires non différenciées et sur la quasi-totalité des membranes cellulaires épithéliales, mais absente des membranes cellulaires mésodermiques ou neurales ; on la trouve fréquemment à la surface des adénocarcinomes.
• C'est un antigène tumoral bien caractérisé et il est associé au cancer colorectal héréditaire sans polypose.
• La protéine maturée contient un peptide signal, une hélice transmembranaire, des ponts disulfures et des sites de N-glycosylation, avec une masse moléculaire calculée d'environ 34,9 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend le domaine extracellulaire (acides aminés 24-265), ce qui permet d'obtenir des anticorps ciblant des épitopes accessibles à la surface cellulaire, adaptés à la coloration de cellules vivantes ou dans des conditions non perméabilisées.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), pensez à optimiser les protocoles de fixation et de perméabilisation en fonction de la localisation de la cible sur les membranes latérales et les jonctions serrées ; validez l'expérience sur des lignées cellulaires épithéliales humaines.
• En cytométrie en flux (FC), utilisez le format conjugué direct ; titrez l'anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal et incluez des contrôles isotypes appropriés.
• En raison de la seule réactivité croisée avec l'humain, vérifiez l'expression de la cible dans votre modèle cellulaire ou tissulaire avant utilisation.
• Le poids protéique est d'environ 35 kDa ; confirmez-le avec des marqueurs de masse moléculaire et des conditions de blocage dans les tests en aval.

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