Anticorps monoclonal lapin anti-CD301/CLEC10A humain pour FC - Q8IUN9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CLEC10A

• CLEC10A est un récepteur lectine de type C transmembranaire de type II avec des isoforms d'épissage alternatif, également connu sous le nom de CD301, lectine de type galactose de macrophage (MGL), HML et récepteur DC-asialoglycoprotéine, exprimé majoritairement sur les cellules myéloïdes présentatrices d'antigènes.
• Il se lie spécifiquement aux résidus terminaux de N-acétylgalactosamine (GalNAc) présents sur les glycoprotéines et les glycolipides, dont l'antigène Tn, le LacdiNAc et les gangliosides GM2/GD2, d'une manière dépendante du Ca2+. Références associées : PMID:15802303, PMID:23507963
• Sur les cellules dendritiques immatures, CLEC10A interagit avec la CD45 modifiée par l'antigène Tn sur les lymphocytes T, diminuant son activité phosphatase pour moduler l'activation, la prolifération et la production de cytokines des lymphocytes T, favorisant la maturation des cellules dendritiques tolérogènes et l'induction de lymphocytes T régulateurs. Références associées : PMID:15802303, PMID:16998493, PMID:22213806
• En tant que récepteur endocytique, CLEC10A internalise les antigènes tumoraux porteurs de l'antigène Tn pour leur présentation par les molécules MHC de classe I et II, reliant la reconnaissance innée aux réponses immunitaires antitumorales adaptatives. Références associées : PMID:15802303, PMID:17616966, PMID:17804752
• Au niveau sous-cellulaire, CLEC10A est localisée sur la membrane plasmique et, après liaison à son ligand, est acheminée vers les membranes des endosomes précoces et des lysosomes pour le traitement de l'antigène.
• Au niveau protéique, CLEC10A est exprimée dans les cellules myéloïdes présentatrices d'antigènes des ganglions lymphatiques et de la peau, spécifiquement dans les cellules dendritiques dermiques.
• La protéine contient un domaine à bobine pelotonnée, un domaine lectine de type C, une hélice transmembranaire et des sites potentiels de N-glycosylation ; son activité est régulée par le Ca2+ et la formation de ponts disulfure.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 61-316) incluant le domaine de reconnaissance des glucides (CRD), ce qui indique que l'anticorps cible probablement la région de liaison au ligand ; pensez à vérifier l'intégrité de l'épitope structural dans des conditions natives par rapport à des conditions dénaturantes.
• Pour la cytométrie en flux, ce conjugué fluorescent peut être utilisé pour détecter le CLEC10A de surface cellulaire sur les cellules myéloïdes humaines ; effectuez un titrage de l'anticorps et incluez des contrôles d'isotype appropriés pour garantir la spécificité.
• La réactivité croisée avec le CLEC10A humain a été rapportée ; validez la réactivité dans votre système d'échantillon spécifique, en tenant notamment compte des variations potentielles d'isoformes.
• Utilisez un tampon glacé et évitez la perméabilisation à moins que vous ne cibliez des compartiments intracellulaires, car le récepteur est lié à la membrane ; incluez des étapes de blocage des récepteurs Fc pour l'analyse des cellules myéloïdes.
• Envisagez une co-coloration avec des marqueurs de cellules dendritiques (par ex. CD11c, CD1c) pour confirmer l'expression sur les sous-ensembles de cellules dendritiques ; notez que le statut d'activation peut modifier les niveaux d'expression de CLEC10A.

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