Anticorps monoclonal de lapin anti-CD301/CLEC10A humain conjugué à l'ABflo 488 pour la FC - Q8IUN9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD301/CLEC10A

• Le CD301/CLEC10A fonctionne comme un récepteur de type lectine C qui reconnaît spécifiquement les glycanes terminés par la N-acétylgalactosamine (GalNAc) sur les glycoprotéines et les glycolipides de manière dépendante du Ca²⁺, y compris les épitopes de l'antigène Tn, de l'antigène T et du LacdiNAc. Références associées :
  PMID:15802303 | PMID:16998493 | PMID:17616966 | PMID:23507963

• Il agit comme un récepteur de signalisation à l'interface des interactions APC-cellules T, régulant à la baisse l'activité de la phosphatase CD45 sur les cellules T effectrices et favorisant la tolérance des cellules dendritiques, ce qui conduit à la génération de cellules T CD4⁺ régulatrices immunosuppressives. Références associées :
  PMID:15802303 | PMID:16998493 | PMID:22213806

• En tant que récepteur de reconnaissance de motifs endocytiques, le CD301/CLEC10A internalise les mucines tumorales porteuses de l'antigène Tn et les livre aux compartiments endolysosomaux pour la présentation d'antigènes par le CMH de classe I et II, contribuant ainsi à l'immunité antitumorale. Références associées :
  PMID:15802303 | PMID:17616966 | PMID:17804752

• Le CD301/CLEC10A se localise au niveau de la membrane cellulaire, de la membrane de l'endosome précoce et de la membrane du lysosome, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la liaison aux ligands, l'internalisation et le traitement des antigènes.

• La protéine est principalement exprimée dans les cellules présentatrices d'antigènes myéloïdes, y compris les cellules dendritiques dermiques dans les ganglions lymphatiques et la peau.

• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes du CD301/CLEC10A, contribuant à la diversité fonctionnelle ; l'isoforme canonique a une masse moléculaire prédite d'environ 35 kDa, avec des bandes supplémentaires observées à 28 kDa et 32 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 61–316) englobe une grande partie du domaine extracellulaire, y compris le domaine de reconnaissance des glucides (CRD). Cette conception permet probablement de générer des anticorps qui reconnaissent le CD301/CLEC10A natif en cytométrie en flux.

• La conjugaison ABflo 488 fournit un marqueur fluorescent direct pour une coloration en une seule étape ; incluez toujours des contrôles d'isotype appropriés et des contrôles de fluorescence moins un (FMO) pour confirmer la spécificité.

• Pour la FC, optimisez les titrages d'anticorps en utilisant une lignée cellulaire pertinente ou des cellules dendritiques myéloïdes primaires ; une plage de concentration de départ typique est de 0,5 à 5 µg par million de cellules, mais cela doit être déterminé empiriquement.

• Étant donné que le CD301/CLEC10A est exprimé sur les DC myéloïdes et les macrophages, envisagez d'utiliser des PBMC ou des cellules dendritiques dérivées de monocytes pour la validation ; vérifiez l'expression par co-coloration avec des marqueurs de lignée (par exemple, CD14, CD1c).

• L'anticorps peut également être approprié pour détecter les cellules dendritiques infiltrant les tumeurs dans des échantillons tumoraux dissociés ; validez les protocoles de fixation et de perméabilisation si une coloration intracellulaire est requise.

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