Anticorps monoclonal lapin anti-humain CD300c pour IF/ICC, FC - Q08708

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD300c

• CD300c (molécule 6 de type CMRF35), codée par le gène CD300C, est une protéine transmembranaire de type I appartenant à la famille CD300 des récepteurs de surface des leucocytes.
• CD300c agit comme un récepteur immunitaire impliqué dans la modulation des réponses immunitaires innées et adaptatives par le biais d'interactions avec ses ligands sur les cellules cibles.
• Il fait partie du groupe de gènes CD300 situé sur le chromosome 17q25, qui code pour des récepteurs contenant des domaines de type immunoglobuline jouant divers rôles dans la régulation des cellules immunitaires.
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transduction de signal après liaison à son ligand.
• CD300c est exprimé à la surface des monocytes, des neutrophiles et de sous-ensembles de lymphocytes T et B du sang périphérique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent un peptide signal, des ponts disulfure et une glycosylation N-liée, caractéristiques des membres de la superfamille des immunoglobulines.
• La structure tridimensionnelle de CD300c a été résolue, ce qui permet de mieux comprendre l'architecture de son domaine extracellulaire et ses surfaces potentielles de liaison aux ligands.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 21–183), ce qui rend l'anticorps adapté à la détection de CD300c de surface par cytométrie en flux sans perméabilisation.
• Le conjugué permet une détection directe en immunofluorescence (IF/ICC) comme en cytométrie en flux (FC) ; veillez à effectuer une compensation appropriée lors d'un multiplexage avec d'autres fluorophores.
• Pour l'IF/ICC, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation, car l'anticorps cible une protéine transmembranaire ; les protocoles classiques utilisant une fixation au PFA à 4 % suivie d'une perméabilisation au Triton X-100 ou à la saponine peuvent être adaptés.
• Incluez des contrôles d'isotype appropriés et des contrôles « fluorescence moins un » (FMO) en cytométrie en flux pour évaluer le bruit de fond de marquage et délimiter les régions de tri.
• L'anticorps étant validé sur échantillons humains, réalisez une expérience de titration pour déterminer la concentration optimale adaptée à votre système cellulaire et votre application spécifique.

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