Anticorps monoclonal lapin anti-CD28 humain pour cytométrie en flux - P10747

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD28

• CD28 est une glycoprotéine de surface spécifique des lymphocytes T, qui agit comme récepteur costimulateur essentiel à l'activation, la prolifération et la survie des lymphocytes T, ainsi qu'au maintien de l'homéostasie immunitaire. Références associées : PMID:1650475 PMID:7568038
• Lors de son interaction avec ses ligands homologues CD80 ou CD86, CD28 amplifie les signaux du TCR et délivre des signaux intracellulaires uniques qui reprogramment l'expression génique des lymphocytes T, entraînant une augmentation de la prolifération et de la production de cytokines, notamment d'IL-2, dans les sous-ensembles de lymphocytes T CD4+ et CD8+. Références associées : PMID:12196291 PMID:24665965 PMID:35397202
• La liaison du ligand déclenche le recrutement de la protéine kinase C-thêta (PRKCQ) et de GRB2, activant NF-kappa-B par des voies dépendantes et indépendantes de PI3K/Akt ; conjointement avec la costimulation TCR/CD3 et CD40L, cela améliore la production d'IL-4 et d'IL-10. Références associées : PMID:21964608 PMID:24665965 PMID:7568038 PMID:8617933
• CD28 potentialise également l'activation médiée par CD40L de NF-kappa-B et des kinases MAPK8 et PAK2 dans les lymphocytes T. Références associées : PMID:15067037
• Exprimé à la surface des lymphocytes T et des plasmocytes, CD28 appartient à la superfamille des immunoglobulines et contient un seul domaine de type V de type Ig, une région transmembranaire et une queue cytoplasmique qui se phosphoryle lors de l'activation.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et la phosphorylation sur des résidus tyrosine, qui sont essentielles pour la transduction du signal.
• La protéine mature a un poids moléculaire calculé d'environ 25 kDa (25066 Da), ce qui est cohérent avec sa détection dans les applications de Western blot et de cytométrie en flux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été généré contre la protéine recombinante humaine CD28 pleine longueur (P10747). Sa performance a été validée en cytométrie en flux (FC) ; pour d'autres applications, les utilisateurs doivent réaliser une optimisation individuelle.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de coloration optimale dans votre système d'échantillon, et incluez des contrôles d'isotype appropriés et des étapes de blocage Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Comme CD28 est rapidement internalisé après activation, envisagez d'effectuer la coloration de surface à 4°C ou d'utiliser un inhibiteur métabolique pour empêcher l'internalisation induite par le ligand si vous étudiez des lymphocytes T activés.
• Confirmez la spécificité de la cible en préincubant l'anticorps avec un excès de protéine CD28 recombinante pour bloquer la coloration spécifique.

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