Anticorps monoclonal lapin anti-CD270/HVEM humain pour cytométrie en flux - Q92956

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD270/HVEM

• CD270/HVEM, également appelé TNFRSF14, HVEA ou TR2, est un récepteur transmembranaire de type I de la superfamille des récepteurs du TNF. Plusieurs isoformes produites par épissage alternatif sont décrites (UniProt Q92956).
• Il fonctionne comme récepteur pour quatre ligands distincts : les membres de la superfamille du TNF TNFSF14/LIGHT et LTA homotrimérique, ainsi que les membres de la superfamille des immunoglobulines BTLA et CD160, formant un réseau complexe de signalisation stimulatrice et inhibitrice (PubMed:10754304, PubMed:18193050, PubMed:23761635). Références associées : PMID:10754304, PMID:18193050, PMID:23761635
• Lors de l'engagement de TNFSF14/LIGHT, il délivre des signaux costimulateurs aux lymphocytes T, favorisant la prolifération cellulaire et les fonctions effectrices via les voies dépendantes de l'E3 ligase TRAF2-TRAF3 (PubMed:19915044, PubMed:9153189, PubMed:9162022). Références associées : PMID:19915044, PMID:9153189, PMID:9162022
• L'interaction avec CD160 sur les cellules NK augmente la production d'interféron-gamma et soutient les réponses immunitaires antitumorales (PubMed:23761635). Dans les cellules épithéliales, la liaison de CD160 déclenche la production de protéines antimicrobiennes et de cytokines pro-inflammatoires. Références associées : PMID:23761635
• La liaison à CD160 sur les lymphocytes CD4+ activés diminue la régulation de la signalisation costimulatrice de CD28, limitant ainsi les réponses immunitaires mémoire et spécifiques des alloantigènes (PubMed:18193050). Références associées : PMID:18193050
• HVEM agit également comme récepteur pour la glycoprotéine D des virus de l'herpès simplex de types 1 et 2 (HSV-1/HHV-1 et HSV-2/HHV-2), médiant l'entrée virale dans les cellules hôtes.
• Localisation subcellulaire : majoritairement au niveau de la membrane cellulaire. Son expression est largement répandue, avec des niveaux les plus élevés dans le poumon, la rate et le thymus, et il est présent sur les lymphocytes B, les monocytes et les lymphocytes T naïfs.
• Les caractéristiques structurelles clés incluent un peptide signal, des répétitions extracellulaires riches en cystéine, une hélice transmembranaire et des motifs de signalisation intracellulaires. Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la phosphorylation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 39 à 162 de CD270/HVEM humain, incluant une partie du domaine extracellulaire. Cette région est importante pour la liaison du ligand et est susceptible de générer des anticorps ciblant la conformation native.
• Cet anticorps est directement conjugué à l', un colorant fluorescent rouge lointain adapté à la cytométrie en flux. Il est recommandé de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale adaptée à vos échantillons cellulaires spécifiques.
• Pour la cytométrie en flux, utilisez des contrôles appropriés incluant les contrôles d'isotype et le tri des cellules viables. Validez la réactivité de l'anticorps avec des lignées cellulaires humaines pertinentes ou des cellules immunitaires primaires connues pour exprimer CD270/HVEM, comme les lymphocytes T, les lymphocytes B ou les monocytes.
• Étant donné que CD270/HVEM est clivé ou peut être internalisé après liaison du ligand, portez une attention particulière à la manipulation des cellules et aux conditions de stimulation lors de la mise en place de votre essai.

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