Anticorps monoclonal de lapin anti-Humain CD261/TRAIL-R1 pour cytométrie en flux - O00220

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD261/TRAIL-R1

• TNFRSF10A, également connu sous le nom de récepteur de mort 4 (DR4) ou TRAIL-R1, est un membre de la superfamille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale. Il sert de récepteur pour le ligand cytotoxique TNFSF10/TRAIL. Références connexes : PMID:26457518, PMID:38532423
• Lors de la liaison de TRAIL, le récepteur recrute la molécule adaptatrice FADD et la caspase-8 pour former le complexe de signalisation inducteur de mort (DISC), qui active de manière protéolytique la caspase-8 et initie la cascade des caspases apoptotiques. Références connexes : PMID:19090789
• TRAIL-R1 favorise également l'activation de NF-kappa-B, le liant aux voies de signalisation inflammatoires et de survie. Références connexes : PMID:9430227
• La protéine se localise principalement à la membrane cellulaire et aux radeaux membranaires, mais a également été détectée dans le cytoplasme et le cytosol.
• Elle est largement exprimée, avec des niveaux élevés dans la rate, les leucocytes du sang périphérique, l'intestin grêle et le thymus, ainsi que dans certaines lignées cellulaires cancéreuses telles que K-562 et MCF-7.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la formation de ponts disulfures, la glycosylation, la méthylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler sa fonction et sa stabilité.
• En tant que protéine transmembranaire de type I, elle contient un peptide signal, des répétitions riches en cystéine extracellulaires, une hélice transmembranaire et un domaine de mort cytoplasmique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 124–232), ce qui suggère que l'anticorps cible un épitope accessible à la surface cellulaire, ce qui est optimal pour la détection par cytométrie en flux de cellules vivantes non perméabilisées.
• En tant que conjugué fluorescent, une titration soigneuse est recommandée pour obtenir le rapport signal/bruit optimal ; les concentrations de départ typiques pour la cytométrie en flux peuvent être comprises entre 0,1 et 1 µg par test, mais cela doit être validé expérimentalement.
• Assurez-vous d'utiliser des contrôles appropriés, y compris des contrôles isotypiques et des cellules non colorées, pour établir les portes et évaluer le marquage de fond spécifique à vos lignées cellulaires et conditions de traitement.
• Pour une analyse complète de l'apoptose induite par TRAIL, envisagez un marquage simultané avec des marqueurs d'apoptose (par exemple, l'Annexine V, la caspase-3 clivée) ou d'autres récepteurs de mort (par exemple, TRAIL-R2/DR5).

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