Anticorps monoclonal lapin anti-humain CD22 pour cytométrie en flux - P20273

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD22

• CD22, également connue sous le nom de Siglec-2 ou molécule d'adhésion des lymphocytes B (BL-CAM), est une glycoprotéine transmembranaire appartenant à la famille des lectines de type immunoglobuline liant l'acide sialique (Siglec). Elle est fortement exprimée sur les cellules B et fonctionne comme un corécepteur inhibiteur qui module la signalisation du récepteur des cellules B (BCR). Références associées : PMID:34330755, PMID:8627166
• Lors de l'activation du BCR, les motifs inhibiteurs à base de tyrosine liés à l'immunorécepteur (ITIM) de CD22 sont phosphorylés par la kinase Src LYN, ce qui recrute la phosphatase de protéine tyrosine PTPN6 (SHP-1). Cela entraîne une atténuation de la mobilisation calcique et de l'activation cellulaire, régulant négativement les réponses des cellules B et pouvant potentiellement induire l'apoptose en cas de signalisation forte. Références associées : PMID:8627166, PMID:20516366
• CD22 se lie spécifiquement aux résidus d'acide sialique liés en α2,6 sur des glycoprotéines telles que CD45, l'IgM et CD22 elle-même dans une configuration cis, et peut également servir de molécule d'adhésion par des interactions trans avec des ligands sur d'autres cellules. Références associées : PMID:20172905
• La protéine joue des rôles essentiels dans la différenciation des cellules B, la présentation d'antigènes et le trafic vers la moelle osseuse, son expression étant principalement limitée aux lymphocytes B matures. Références associées : PMID:34330755, PMID:8627166
• CD22 est soumise à l'épissage alternatif, produisant des variants avec différents nombres de domaines de type immunoglobuline extracellulaires ; elle est également fortement glycosylée et phosphorylée, des caractéristiques qui contribuent à sa fonction et sa régulation.
• La protéine CD22 humaine pleine longueur est composée de 847 acides aminés avec une masse moléculaire calculée d'environ 95,3 kDa, et contient un peptide signal N-terminal, sept domaines de type C2 de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique avec des motifs ITIM et de type ITIM.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé (protéine recombinante couvrant les acides aminés 20–687) couvre toute la région extracellulaire de la CD22 humaine, y compris tous les domaines de type immunoglobuline, ce qui contribue à garantir la reconnaissance de la protéine native sur les cellules vivantes.
• En tant qu'anticorps pré-conjugué (), ce réactif est prêt pour une utilisation directe en cytométrie en flux sans étape de coloration secondaire ; néanmoins, titrez l'anticorps sur les lignées cellulaires positives et négatives concernées pour déterminer la concentration de travail optimale.
• Les lignées de cellules B humaines courantes (par exemple Raji, Daudi, Ramos) expriment des niveaux élevés de CD22 et peuvent servir de contrôles positifs ; un anticorps de contrôle d'isotype est recommandé pour évaluer la liaison non spécifique de fond.
• Pour les panels de cytométrie en flux multicolore, prévoyez des contrôles de compensation de fluorescence et gardez à l'esprit que l'expression de CD22 peut être modulée par le statut d'activation des cellules B.

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