Anticorps monoclonal lapin anti-Human CD16b pour cytométrie en flux - O75015

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur III-B de la région Fc gamma des immunoglobulines de faible affinité (CD16b)

• Le CD16b (FCGR3B) est un récepteur de faible affinité pour la région Fc des immunoglobulines gamma (IgG) et se lie à la fois aux IgG complexées/agrégées et monomériques. Contrairement à son paralogue CD16a (FCGR3A), il ne médie pas la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) ni la phagocytose.
• Il peut fonctionner comme un piège pour les complexes immuns circulants, empêchant l'activation des neutrophiles tout en aidant à éliminer les agrégats IgG-antigène de la circulation périphérique.
• La protéine est exprimée spécifiquement sur les leucocytes polymorphonucléaires (neutrophiles) et également sur les éosinophiles stimulés, ce qui la distingue du motif d'expression plus large du CD16a.
• Le CD16b est un produit d'épissage alternatif du gène FCGR3B ; il est ancré à la membrane via un groupement glycosylphosphatidylinositol (GPI), dépourvu de domaine transmembranaire.
• Outre sa forme membranaire complète, une forme sécrétée peut être générée par clivage protéolytique, étendant ainsi ses rôles immuno-régulateurs.
• Les caractéristiques structurelles clés incluent deux domaines de type immunoglobuline, des ponts disulfure conservés et de multiples sites de N-glycosylation critiques pour la liaison du ligand et la stabilité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire (acides aminés 20–208), ciblant la région de liaison du ligand ; il est censé reconnaître à la fois les formes membranaires et solubles du CD16b.
• Cet anticorps est directement conjugué à l', un fluorophore rouge lointain photostable, et convient à la cytométrie en flux sans nécessiter d'étape de coloration secondaire.
• Pour un marquage optimal de la surface cellulaire, utilisez du sang total lavé ou des neutrophiles purifiés ; la fixation/perméabilisation n'est pas requise sauf si la détection intracellulaire ou de la protéine totale est souhaitée.
• Comme l'expression du CD16b est restreinte aux neutrophiles et aux éosinophiles stimulés, incluez toujours des contrôles isotypiques appropriés et un marqueur pan-leucocytaire (par exemple, CD45) pour valider la spécificité du type cellulaire.
• Lors de l'analyse de la liaison de complexes immuns, envisagez un pré-blocage avec du sérum humain ou de l'IgG purifiée pour minimiser les interactions non spécifiques via les récepteurs Fc autres que le CD16b.

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