Anticorps monoclonal de lapin anti-CD166/ALCAM humain conjugué pour la cytométrie en flux - Q13740

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD166/ALCAM

• Le CD166/ALCAM, également connu sous le nom de molécule d'adhésion des leucocytes activés, est une molécule d'adhésion cellulaire qui médie les contacts cellule-cellule hétérotypiques (avec CD6) et homotypiques, jouant un rôle clé dans l'activation des lymphocytes T et la formation de la synapse immunologique. Références associées : PMID:15048703, PMID:15496415, PMID:16352806, PMID:24945728, PMID:15294938
• Il agit comme un ligand pour le récepteur inhibiteur LILRB4, supprimant la prolifération des lymphocytes T, et est essentiel pour la greffe des cellules souches hématopoïétiques dans la moelle osseuse. Références associées : PMID:29263213, PMID:24740813
• Les interactions homotypiques de l'ALCAM facilitent l'attachement des cellules dendritiques aux cellules endothéliales et inhibent la migration des cellules endothéliales tout en favorisant la formation de tubes. Références associées : PMID:23169771, PMID:15496415
• Une isoforme sécrétée alternativement épissée antagonise les fonctions de l'ALCAM lié à la membrane, inhibant l'attachement cellulaire et favorisant la migration des cellules endothéliales.
• Sur le plan subcellulaire, l'ALCAM est localisé au niveau de la membrane cellulaire, y compris les projections axonales et dendritiques, et peut être sécrété.
• L'expression tissulaire est large : détectée sur les cellules souches hématopoïétiques, les lymphocytes T/B activés, les monocytes, les cellules dendritiques et diverses cellules endothéliales et épithéliales ; élevée dans les lignées de mélanome métastatique. Références associées : PMID:24740813, PMID:23169771, PMID:15048703, PMID:16352806, PMID:9502422, PMID:7760007, PMID:15496415
• La protéine contient des domaines de type immunoglobuline, est glycosylée et possède des ponts disulfures ; l'isoforme canonique a un poids moléculaire prédit d'environ 65 kDa, mais plusieurs bandes peuvent être observées en raison de l'épissage et de la glycosylation.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène englobe le domaine extracellulaire (aa 28–526), qui inclut la région de liaison au ligand ; cela suggère que l'anticorps reconnaît probablement un épitope accessible sur les cellules vivantes, adapté à la cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps afin de déterminer la concentration de marquage optimale pour votre type cellulaire ; incluez des contrôles isotypiques appropriés.
• Comme l'expression de l'ALCAM varie selon les types cellulaires et les états d'activation, validez le marquage sur des contrôles positifs (par exemple, lymphocytes T activés, cellules dendritiques) et négatifs connus.
• Les multiples bandes protéiques (15–65 kDa) annotées dans les spécifications peuvent refléter des variants d'épissage ou des produits de clivage ; si vous effectuez un western blot, confirmez la spécificité avec un lysat de cellules surexprimant l'ALCAM.
• Cet anticorps est validé pour la réactivité humaine ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'est pas rapportée et doit être testée si nécessaire.

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