anticorps monoclonal de lapin anti-CD158 humain (KIR2DL1/S1/S2/S3/S5) pour cytométrie en flux - Q14954 / Q14953 / Q14952 / P43631 / P43626

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du CD158 (KIR2DL1/S1/S2/S3/S5)

• KIR2DS1 (CD158H) est un membre de la famille des récepteurs de type immunoglobuline des cellules tueuses (KIR), caractérisé par deux domaines extracellulaires de type immunoglobuline et une courte queue cytoplasmique dépourvue de motifs inhibiteurs à base de tyrosine des récepteurs immunitaires (ITIM).
• Il fonctionne comme un récepteur activateur sur les cellules tueuses naturelles (NK), reconnaissant spécifiquement certains allèles HLA-C tels que w6, et n’inhibe pas l’activité des cellules NK, favorisant la cytotoxicité et la libération de cytokines lors de la liaison au ligand.
• La famille de gènes KIR est fortement polymorphe et se situe sur le chromosome 19q13.4 ; cet anticorps présente une réactivité croisée avec plusieurs membres KIR, notamment KIR2DS1, KIR2DS2, KIR2DS3, KIR2DL1 et KIR2DL3, en raison d’épitope(s) commun(s), permettant une détection étendue des sous-populations de cellules NK positives pour CD158.
• KIR2DS1 est localisé sur la membrane cellulaire, caractéristique des récepteurs transmembranaires de type I, et est principalement exprimé sur les cellules NK, jouant un rôle clé dans la surveillance immunitaire et la réponse aux cellules infectées par des virus ou transformées.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la formation de ponts disulfure, la glycosylation liée à l’azote et la présence d’un peptide signal N-terminal, contribuant toutes au repliement correct et à l’expression en surface.
• Les mots-clés UniProt soulignent ses caractéristiques de récepteur membranaire, de glycoprotéine et de membre de la superfamille des immunoglobulines, avec des répétitions structurales communes aux molécules KIR.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour la cytométrie en flux, effectuez une titration de l’anticorps afin de déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique, en commençant généralement par une plage de 0,5 à 5 µg par test, et incluez des contrôles isotopiques appropriés.
• Lors de son utilisation dans des panels multicolores, veillez à préparer des contrôles de compensation appropriés, car le fluorophore peut nécessiter une compensation en raison d’un chevauchement spectral avec des colorants similaires.
• Validez l’anticorps dans le système d’échantillons approprié, tel que des cellules mononucléées du sang périphérique humain (PBMC) ou des cellules NK isolées, et envisagez l’utilisation de réactifs bloquant les récepteurs Fc afin de minimiser les liaisons non spécifiques.
• L’immunogène correspond aux acides aminés 22 à 245, qui couvrent le domaine extracellulaire du CD158 ; l’anticorps devrait donc détecter les récepteurs exprimés en surface et pourrait ne pas reconnaître les formes intracellulaires ou non transformées.
• Évitez l’azoture de sodium lors de la réalisation d’essais fonctionnels, car il peut interférer avec la viabilité cellulaire et l’activation des cellules NK ; utilisez des formulations sans conservateur ou lavez soigneusement les cellules avant les applications ultérieures.

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