Anticorps monoclonal de lapin anti-CD141/Thrombomoduline humaine pour cytométrie en flux - P07204

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la thrombomoduline

• La thrombomoduline (CD141/BDCA-3, également appelée fétomoduline) est un récepteur transmembranaire abondamment exprimé sur les cellules endothéliales vasculaires, qui intervient dans l'hémostase, la coagulation, la fibrinolyse, l'inflammation et l'angiogenèse. Références associées : PMID:10761923
• Elle agit comme cofacteur de l'activation de la protéine C médiée par la thrombine à la surface endothéliale, initiant la voie anticoagulante. Références associées : PMID:29323190, PMID:33836597, PMID:9395524
• La thrombomoduline accélère l'activation de la carboxypeptidase B2 plasmatique (CPB2), qui clive les acides aminés basiques C-terminaux des kinines et des anaphylatoxines, contribuant à l'inhibition de la fibrinolyse. Références associées : PMID:26663133
• Elle supprime l'inflammation en séquestrant la molécule pro-inflammatoire HMGB1, empêchant son interaction avec RAGE et d'autres récepteurs. Références associées : PMID:15841214
• La protéine modifie la spécificité de clivage du récepteur 1 activé par la protéase (PAR1), inhibant ainsi la perméabilité endothéliale et l'inflammation (par similarité).
• Localisation subcellulaire : majoritairement liée à la membrane.
• Spécificité tissulaire : l'expression est unique aux cellules endothéliales.
• Les caractéristiques structurelles incluent un domaine de type EGF, des ponts disulfure, une glycosylation et une modification de protéoglycane ; la protéine mature migre à environ 60 kDa.

Guide expérimental et conseils techniques

• Ce conjugué est destiné à la coloration par immunofluorescence directe et à la détection par cytométrie en flux de la CD141/Thrombomoduline humaine à la surface de cellules vivantes ou fixées.
• La concentration optimale de l'anticorps doit être déterminée par titration dans le système expérimental concerné ; une plage de départ de 0,5 à 5 µg/mL est souvent utilisée pour la coloration de surface cellulaire.
• Utilisez un contrôle d'isotype et un colorant de viabilité appropriés pour distinguer les cellules vivantes et minimiser le bruit de fond.
• Pour la préparation des échantillons, évitez une sur-digestion à la trypsine car la thrombomoduline est sensible à la trypsine ; envisagez d'utiliser des réactifs de dissociation non enzymatiques.
• La CD141 est fortement exprimée sur les cellules endothéliales vasculaires ; utilisez des cultures de cellules endothéliales primaires ou des cellules progénitrices endothéliales sanguines périphériques comme contrôle positif.
• Notez que l'anticorps reconnaît un épitope extracellulaire ; la perméabilisation n'est pas requise pour la coloration de surface, mais peut être utilisée pour les pools intracellulaires si nécessaire après fixation.

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