mAb Lapin anti-CD117/c-Kit humain pour cytométrie en flux - P10721

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit est un récepteur tyrosine kinase codé par le gène KIT, également appelé récepteur du facteur de croissance des mastocytes/cellules souches, SCFR ou protéine du trait pie (PBT).
• Il agit comme récepteur à la surface cellulaire de la cytokine KITLG/SCF, jouant un rôle essentiel dans la survie cellulaire, la prolifération, l'hématopoïèse, le maintien des cellules souches, la gamétogenèse, le développement des mastocytes, la migration et la mélanogenèse.
• Après liaison au ligand, c-Kit active de multiples cascades de signalisation en aval, notamment les voies PI3K-AKT, RAS-MAPK et JAK-STAT, par phosphorylation d'adaptateurs tels que PIK3R1, GRB2 et les protéines STAT.
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire et peut également être trouvée dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle de récepteur transmembranaire qui subit une internalisation.
• Chez l'homme, dans le testicule, CD117 est exprimé dans les spermatogonies et les cellules de Leydig interstitielles, et est conservé dans les spermatozoïdes éjaculés, suggérant un rôle dans la spermatogenèse. Références associées : PMID:20601678
• c-Kit est classé comme proto-oncogène, et des mutations ou une activation aberrante sont associées à divers cancers ; il appartient à la famille des récepteurs tyrosine kinases de type III et contient des domaines de type immunoglobuline dans sa région extracellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, la formation de ponts disulfure et l'ubiquitination, qui régulent sa stabilité et sa signalisation.
• La protéine c-Kit humaine pleine longueur a un poids moléculaire prédit d'environ 110 kDa, ce qui correspond au poids observé dans les spécifications du produit.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps étant conçu pour la cytométrie en flux (CF), il est adapté au marquage de surface de cellules vivantes, ciblant le domaine extracellulaire (aa 26-520) du CD117 humain.
• Pour des performances optimales, titrez l'anticorps afin de déterminer la concentration adaptée à votre type de cellule et à vos conditions expérimentales spécifiques.
• Lors de l'analyse de cellules souches hématopoïétiques ou de mastocytes, envisagez un co-marquage avec des marqueurs de lignée pour filtrer les populations CD117-positives.
• Compte tenu de l'internalisation du récepteur après liaison au ligand, évitez une incubation prolongée avec KITLG/SCF lors des protocoles expérimentaux nécessitant un marquage de surface.
• Bien que validé pour l'homme, tenez compte de la réactivité croisée potentielle avec d'autres espèces en fonction de l'homologie de séquence ; si nécessaire, vérifiez-la à l'aide du système modèle approprié.

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