Anticorps monoclonal de lapin anti-calréticuline humaine pour FC (intra) - P27797

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la calréticuline

• La calréticuline est une chaperonne de liaison au calcium hautement conservée, également connue sous les noms de CRP55, Calregulin, ERp60, HACBP ou grp60. Elle est le produit du gène CALR chez l’être humain (Gene ID : 811).
• Dans le réticulum endoplasmique, la calréticuline agit comme une chaperonne de type lectine qui favorise le repliement, l’assemblage oligomérique et le contrôle qualité des glycoprotéines nouvellement synthétisées via le cycle calréticuline/calnexine. Elle interagit transitoirement avec presque toutes les glycoprotéines monoglucosylées synthétisées dans le RE. Références associées : PMID:7876246
• Au-delà du RE, la calréticuline interagit avec le domaine de liaison à l’ADN du récepteur nucléaire NR3C1 et en assure l’exportation nucléaire, reliant ainsi cette protéine à la régulation transcriptionnelle. Références associées : PMID:11149926
• La calréticuline est impliquée dans la biologie de la reproduction, où elle participe à la régulation de l’expression des gènes maternels et pourrait contribuer à la maturation des ovocytes par l’intermédiaire de l’homéostasie du calcium. Dans les ovocytes non activés, elle est présente dans les granules corticaux et est exocytée lors de la réaction corticale afin de contribuer à prévenir la polyspermie.
• Au niveau subcellulaire, la calréticuline se trouve principalement dans la lumière du réticulum endoplasmique, mais elle peut également être localisée dans le cytosol, l’espace extracellulaire, à la surface cellulaire, dans le réticulum sarcoplasmique et dans des vésicules sécrétoires telles que les granules corticaux et cytolytiques.
• La protéine subit diverses modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, l’hydroxylation et la formation de ponts disulfure. Elle possède un peptide signal, des motifs répétitifs et est associée à plusieurs mots-clés : chaperonne, calcium, liaison aux métaux (zinc), glycoprotéine, lectine, entre autres.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 335–417 de la calréticuline humaine, une région C-terminale distincte du peptide signal et des domaines de chaperonne N-terminaux. Cette conception peut permettre la détection de la calréticuline totale, indépendamment de son statut de rétention dans le RE ou de sécrétion.
• La calréticuline étant principalement située dans la lumière du RE, la cytométrie en flux intracellulaire (FC intra) nécessite la fixation et la perméabilisation des cellules. Optimisez les conditions de perméabilisation (par exemple, avec de la saponine ou du méthanol) afin de garantir l’accès de l’anticorps tout en préservant la réactivité de l’épitope.
• est un fluorophore rouge lointain qui permet le multiplexage avec d’autres marqueurs intracellulaires tout en minimisant le chevauchement spectral. Titrer l’anticorps afin de déterminer le rapport signal/bruit optimal pour votre système expérimental spécifique.
• Envisagez d’utiliser cet anticorps pour étudier le stress du RE, la dynamique du contrôle qualité des protéines ou les événements de translocation de la calréticuline dans des modèles cellulaires humains. Comme pour toute coloration intracellulaire, incluez des contrôles appropriés (cellules non stimulées, contrôles isotypiques et fluorescence moins un) afin de valider la spécificité.

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