Anticorps monoclonal de lapin anti-humain C5AR1/CD88 conjugué à ABflo 488 pour la cytométrie en flux - P21730

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de C5AR1/CD88

• C5AR1/CD88 est un membre de la famille des récepteurs couplés aux protéines G (RCPG) et agit comme le récepteur de l'anaphylatoxine C5a, un peptide chimiotactique et inflammatoire puissant. Références associées : PMID:10636859 PMID:15153520 PMID:1847994
• Après liaison du C5a, le récepteur stimule le chimiotactisme, la libération d'enzymes granuleuses, la mobilisation du calcium intracellulaire et la production d'anions superoxydes, entraînant les réponses immunitaires innées. Références associées : PMID:10636859 PMID:15153520 PMID:1847994
• L'interaction ligand-récepteur implique deux sites distincts : un site de haute affinité sur l'extrémité N-terminale extracellulaire et un second site dans la région transmembranaire qui déclenche les événements de signalisation en aval. Références associées : PMID:7622471 PMID:8182049 PMID:9553099
• La signalisation est principalement médiée par un couplage aux protéines G(i)/G(o) (GNAI1 ou GNAO1), conduisant à l'inhibition de l'adénylate cyclase et à la modulation des niveaux intracellulaires d'AMPc. Références associées : PMID:36806352 PMID:37852260
• Au niveau subcellulaire, C5AR1 est principalement localisé à la membrane cellulaire, mais peut également être trouvé dans des vésicules cytoplasmiques après internalisation induite par un agoniste.
• Les modifications post-traductionnelles, y compris la glycosylation, la phosphorylation, la sulfatation et la formation de ponts disulfure, sont cruciales pour le repliement correct du récepteur, la liaison du ligand et la transduction du signal.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'anticorps est un monoclonal de lapin conjugué à ABflo 488, permettant une détection directe par fluorescence en cytométrie en flux sans anticorps secondaire. Optimisez les protocoles de marquage pour des échantillons humains de cellules vivantes ou fixées exprimant C5AR1.
• Étant donné que l'immunogène est un peptide synthétique situé dans la région N-terminale (aa 1–100), envisagez d'utiliser le même peptide comme contrôle de blocage pour confirmer la spécificité du marquage dans votre configuration expérimentale.
• La réactivité humaine est confirmée ; si une réactivité croisée avec d'autres espèces est requise, validez-la indépendamment en utilisant des lignées cellulaires ou des cellules primaires appropriées.
• En tant que RCPG, C5AR1 peut subir une internalisation rapide après stimulation par un ligand ; pour détecter l'expression de surface, effectuez le marquage à 4°C ou en présence d'azoture de sodium pour inhiber le renouvellement du récepteur.
• Bien que validé uniquement pour la cytométrie en flux, l'anticorps peut être adapté à d'autres applications (par exemple, immunofluorescence, immunoprécipitation) avec une optimisation expérimentale et des contrôles appropriés.

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