Anticorps monoclonal de lapin anti-BCL6 humain pour cytométrie en flux (intracellulaire) - P41182

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la BCL6

• BCL6 (lymphome B 6) est un répresseur transcriptionnel et un proto-oncogène, également connu sous les noms de BCL5, LAZ3, ZBTB27 et ZNF51, codant pour une protéine contenant un domaine doigt de zinc et un domaine BTB/POZ.
• C'est un régulateur maître des réactions du centre germinatif (CG), il réprime les gènes impliqués dans la différenciation, l'inflammation, l'apoptose et le cycle cellulaire pour permettre la prolifération rapide des lymphocytes B et l'hypermutation somatique.
• BCL6 se lie directement au motif ADN spécifique 5'-TTCCTAGAA-3' et réprime également les facteurs de transcription, augmentant indirectement l'expression d'AICDA en supprimant des microARN comme le miR-155.
• Dans les lymphocytes T folliculaires auxiliaires (TFH), BCL6 promeut l'expression génique spécifique des TFH tout en inhibant la différenciation vers les lignées TH1, TH2 et TH17, et est essentiel à la mémoire immunologique tant des lymphocytes T que B.
• Au-delà des lymphocytes, BCL6 supprime la prolifération des macrophages en entrant en compétition avec STAT5 pour les motifs de liaison sur des gènes cibles comme CCL2 et CCND2.
• BCL6 est principalement localisée dans le noyau, ce qui est cohérent avec sa fonction de régulateur transcriptionnel liant l'ADN.
• Elle est exprimée dans les lymphocytes T et B du centre germinatif et les cellules dendritiques immatures primaires, et une expression anormale est impliquée dans les lymphomes B via des réarrangements chromosomiques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, qui modulent sa stabilité, son activité répressive et son interaction avec les corépresseurs.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène (résidus 235–350 de la BCL6 humaine/souris) correspond à une région centrale contenant des domaines fonctionnellement importants ; l'accessibilité de l'épitope lors d'une coloration intracellulaire peut dépendre d'une perméabilisation nucléaire efficace.
• Pour la cytométrie en flux, utilisez des protocoles de fixation et de perméabilisation validés pour les protéines nucléaires, et incluez un contrôle isotype approprié ainsi que des populations cellulaires positives connues (ex : lignées cellulaires B Ramos, Daudi) et négatives.
• La concentration de l'anticorps doit être optimisée par titrage ; l'application fournie est la cytométrie en flux intracellulaire — d'autres applications n'ont pas été testées et nécessitent une validation individuelle.
• L'expression de BCL6 peut être transitoire et dépendante du contexte ; tenez compte des conditions de stimulation ou de différenciation pour moduler les niveaux d'expression dans vos systèmes expérimentaux.

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