anticorps monoclonal de lapin anti-AXL humain pour cytométrie en flux - P30530

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’AXL

• L’AXL, codé par le gène AXL (UFO), est une tyrosine kinase réceptrice appartenant à la famille TAM (Tyro3, AXL, Mer) et est également connu sous les noms ARK, UFO, JTK11 et Tyro7.
• L’AXL transmet les signaux extracellulaires en se liant à son ligand GAS6, régulant la survie, la prolifération, la migration et la différenciation cellulaires. La liaison au ligand induit la dimérisation et l’autophosphorylation, activant la signalisation AKT en aval via la PI3-kinase et GRB2.
• L’AXL est localisé sur la membrane cellulaire en tant que protéine membranaire de type I à passage unique.
• L’AXL inhibe la signalisation immunitaire innée médiée par les récepteurs Toll-like (TLR), modulant ainsi la réponse immunitaire.
• L’AXL sert de récepteur sur les cellules hôtes pour plusieurs virus, notamment le virus de Lassa, le virus de la chorioméningite lymphocytaire, le virus Ebola et le virus Zika. Pour le virus Zika, l’AXL favorise l’entrée virale dans les cellules gliales, les cellules de Sertoli et les astrocytes, et potentialise l’activité kinase afin d’antagoniser la signalisation de l’interféron de type I par un mécanisme dépendant de SOCS1. Références associées : PMID:28076778 PMID:29379210 PMID:31311882
• L’AXL est fortement exprimé dans les tumeurs coliques métastatiques, avec une expression plus faible dans les tumeurs primaires et une expression faible dans les tissus coliques normaux, ce qui suggère un rôle dans la progression du cancer.
• Les principales modifications post-traductionnelles de l’AXL comprennent la glycosylation, la formation de ponts disulfure, la phosphorylation et l’ubiquitination, conformément à ses fonctions de signalisation et de renouvellement.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène (aa 33-449) englobe le domaine extracellulaire de l’AXL humain, ce qui suggère que l’anticorps reconnaît probablement le récepteur natif à la surface cellulaire, le rendant adapté à la cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux, effectuez une titration de l’anticorps afin de déterminer la concentration de coloration optimale, utilisez des colorants de viabilité pour exclure les cellules mortes et incluez des anticorps témoins isotopiques appropriés pour un réglage précis des fenêtres d’analyse.
• Validez la spécificité de l’anticorps sur des contrôles positifs, tels que des cellules transfectées par AXL ou des lignées cellulaires connues pour exprimer AXL, ainsi que sur des contrôles négatifs.
• Comme il s’agit d’un anticorps directement conjugué (ABflo 488), une détection secondaire n’est pas nécessaire ; protégez-le de la lumière pendant la coloration et l’acquisition afin de préserver l’intégrité du signal.

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