Anticorps polyclonal de lapin PTPRA pour WB et ELISA - P18433

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PTPRA

• La PTPRA (protéine tyrosine phosphatase alpha de type récepteur) est un membre de la famille classique des protéines tyrosine phosphatases, elle contient deux domaines phosphatase intracellulaires et une seule région transmembranaire.
• Elle exerce principalement sa fonction dans la dynamique des adhésions focales médiée par les intégrines : elle recrute les protéines adaptatrices BCAR3, BCAR1 et CRK sur les sites d'adhésion lors de l'activation des intégrines.
• Ce recrutement facilite la phosphorylation de BCAR1 médiée par SRC et l'activation en aval de la kinase PAK et des petites GTPases RAC1 et CDC42, régulant ainsi la réorganisation du cytosquelette.
• La PTPRA se localise principalement sur la membrane cellulaire et est enrichie au niveau des jonctions cellulaires et des adhésions focales, ce qui est cohérent avec son rôle dans la signalisation médiée par l'adhésion.
• La protéine subit un épissage alternatif et est glycosylée, avec un poids moléculaire prédit d'environ 90,7 kDa, souvent observé à 91 kDa sur les immunoblots.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation sur plusieurs résidus, et la protéine est classée sous des mots-clés tels que structure 3D, glycoprotéine, hydrolase et protéome de référence.
• Bien qu'elle soit principalement étudiée chez l'homme, son expression conservée chez la souris et le rat explique sa réactivité croisée chez ces espèces.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 175 à 295 du domaine extracellulaire, ce qui suggère que l'anticorps peut détecter les formes glycosylées et précurseurs ; la déglycosylation peut simplifier le profil des bandes.
• Pour le Western blot, des conditions réductrices standard et un gel SDS-PAGE à 7,5-10% sont recommandés ; enrichissez les fractions membranaires ou les préparations d'adhésions focales pour augmenter l'intensité du signal.
• Une bande proche de 91 kDa est attendue ; vérifiez le poids moléculaire avec un marqueur adapté et prenez en compte la possibilité de variants d'épissage alternatif de taille légèrement différente.
• Pour l'ELISA, titrez l'anticorps en tant que réactif de capture ou de détection contre des fragments recombinants de PTPRA ou des lysats cellulaires ; validez la spécificité en utilisant des modèles cellulaires surexprimant la PTPRA vs. des modèles cellulaires avec extinction de la PTPRA.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat a été confirmée, mais validez toujours systématiquement dans votre système cellulaire ou tissinal spécifique en raison d'éventuelles variations d'épitope.

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