PRPF4 Lapin mAb - O43172

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PRPF4

• PRPF4 code pour la petite ribonucléoprotéine nucléaire U4/U6 Prp4, également connue sous le nom de hPrp4 ou protéine U4/U6 snRNP de 60 kDa, un composant central du spliceosome.
• En tant que partie du complexe tri-snRNP U4/U6-U5, PRPF4 est essentielle pour l'épissage des pré-ARNm ; elle participe à l'assemblage du spliceosome et est présente dans le complexe B précatalytique.
• PRPF4 appartient à la famille des protéines à répétitions WD, caractérisée par de multiples répétitions WD40 qui médient les interactions protéine-protéine.
• La protéine se localise dans le noyau et est enrichie dans les speckles nucléaires, qui sont des sites de stockage et de modification des facteurs d'épissage.
• PRPF4 subit une acétylation post-traductionnelle, qui peut réguler son activité ou ses interactions.
• Des mutations dans PRPF4 sont associées à la rétinite pigmentaire, une maladie dégénérative rétinienne héréditaire, soulignant son importance au-delà de l'épissage.
• L'épissage alternatif de PRPF4 produit de multiples isoformes, augmentant potentiellement sa diversité fonctionnelle.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène englobe la région C-terminale (aa 450-522) de la PRPF4 humaine, un domaine probablement conservé entre les espèces ; envisagez un alignement de séquences pour prédire la réactivité croisée chez d'autres organismes.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit de PRPF4 est d'environ 58 kDa ; vérifiez en utilisant des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de cellules HeLa ou HEK293) et utilisez des inhibiteurs de protéases frais pour prévenir la dégradation.
• En immunohistochimie (IHC-P), une coloration nucléaire est attendue, avec un enrichissement possible dans les speckles nucléaires ; optimisez la récupération antigénique et la dilution de l'anticorps pour les coupes incluses en paraffine.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour détecter la PRPF4 recombinante ou endogène ; validez la linéarité et la spécificité dans la matrice d'échantillon pertinente.
• Étant donné que PRPF4 est impliquée dans l'assemblage du spliceosome, envisagez de tester la co-immunoprécipitation pour étudier les interactions protéiques, bien que cette application ne soit pas validée pour cet anticorps.

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