Anticorps polyclonal de lapin anti-PPL pour WB, IF-P, ELISA - O60437

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la périplakine

• La périplakine (PPL) est une grande protéine de liaison du cytosquelette, également connue sous le nom de précurseur de 195 kDa de l’enveloppe cornée ou d’antigène de 190 kDa du pemphigus paranéoplasique, qui intègre l’enveloppe cornée aux desmosomes et aux filaments intermédiaires.
• Elle est essentielle à la différenciation épidermique et à la fonction de barrière, agissant comme une structure d’ancrage reliant l’enveloppe cornée à la plaque desmosomale et aux filaments intermédiaires de kératine dans les kératinocytes.
• Au-delà de son rôle structural, la PPL pourrait moduler la signalisation PKB/AKT en servant de signal de localisation subcellulaire et en influençant les voies de survie et du métabolisme cellulaires.
• Au niveau subcellulaire, la PPL se localise au niveau des desmosomes aux jonctions intercellulaires, de la membrane cellulaire latérale et du cytosquelette cortical ; une fraction cytoplasmique diffuse est également présente.
• L’expression est principalement observée dans les épithéliums malpighiens stratifiés, tels que l’épiderme, ainsi que dans certains autres tissus épithéliaux, ce qui est cohérent avec son rôle clé dans la cornification.
• La PPL subit une phosphorylation et contient plusieurs domaines d’interaction protéique, notamment un domaine SH3 N-terminal et des régions centrales répétées en hélice enroulée, qui assurent ses fonctions d’ancrage.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de la PPL est d’environ 205 kDa ; utilisez un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple 6 %) et prolongez les temps de transfert afin d’assurer un transfert efficace de cette protéine de haut poids moléculaire.
• En immunofluorescence sur des coupes incluses en paraffine (IF-P), les conditions de récupération antigénique doivent être soigneusement optimisées, et une perméabilisation suffisante est essentielle compte tenu de l’association de la protéine aux desmosomes et au cytosquelette.
• La réactivité croisée rapportée de l’anticorps avec la souris et le rat permet de réaliser des études translationnelles ; toutefois, validez la réactivité dans le tissu concerné en incluant des témoins positifs (par exemple, la peau) et négatifs (par exemple, un tissu non épithélial).
• En tant qu’anticorps polyclonal, les performances peuvent varier d’un lot à l’autre ; nous recommandons de réaliser un titrage de l’anticorps et d’inclure un témoin positif connu dans chaque expérience afin de confirmer la cohérence entre les lots.

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