PLOD3 Ac mAb - O60568

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PLOD3

• Identité et fonction de la protéine : PLOD3, également connu sous le nom de LH3 (lysyl hydroxylase 3), est une enzyme multifonctionnelle qui effectue des modifications post-traductionnelles critiques sur les résidus de lysine du collagène.
• Activité hydroxylase : Elle catalyse l'hydroxylation de la lysine dans les motifs -Xaa-Lys-Gly- des procollagènes, générant de l'hydroxylysine. Cette étape est essentielle pour la stabilité thermique du collagène et la formation de ponts croisés. Références connexes : PMID:11956192, PMID:12475640, PMID:18298658
• Activités glycosyltransférase : Suite à l'hydroxylation, l'enzyme ajoute séquentiellement du galactose et du glucose à l'hydroxylysine, formant du 1,2-glucosylgalactosyl-5-hydroxylysine. Ces événements de glycosylation sont indispensables pour la sécrétion du collagène de type IV, l'assemblage de la membrane basale, et se produisent également sur le domaine de type collagène de MBL1. Références connexes : PMID:12475640, PMID:18298658, PMID:18834968, PMID:10934207, PMID:11896059, PMID:11956192, PMID:25419660
• Localisation subcellulaire : PLOD3 réside principalement dans la lumière et la membrane du réticulum endoplasmique rugueux (RE), avec une fraction mineure sécrétée dans l'espace extracellulaire. Cela est cohérent avec son rôle dans le traitement du collagène au sein de la voie sécrétoire.
• Distribution tissulaire : Expression ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le cœur, le placenta et le pancréas, et des niveaux plus faibles dans le poumon, le foie et le muscle squelettique. Références connexes : PMID:9582318, PMID:9724729
• Exigences en cofacteurs : Le domaine hydroxylase dépend de Fe²⁺, 2-oxoglutarate, O₂ et d'ascorbate (vitamine C), tandis que les activités glycosyltransférase nécessitent probablement Mn²⁺.
• Caractéristiques structurelles : L'enzyme est elle-même une glycoprotéine avec des ponts disulfure intramoléculaires.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Western blotting : Dans des conditions réductrices et dénaturantes, une bande spécifique d'environ 85 kDa devrait être observée. Utilisez un chargement approprié de protéines et validez avec une lignée cellulaire pertinente ou un lysat tissulaire exprimant PLOD3.
• Immunohistochimie (paraffine) : Une récupération standard de l'antigène (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) et des étapes de blocage sont recommandées. L'optimisation de la concentration de l'anticorps primaire et du système de détection est conseillée.
• ELISA : L'anticorps peut être utilisé dans des formats ELISA direct ou de capture. Un titrage de l'antigène de revêtement et de la concentration de l'anticorps doit être effectué pour déterminer les conditions optimales.
• Considérations sur l'immunogène : Cet anticorps a été élevé contre une protéine recombinante couvrant les acides aminés 25–306 (région N-terminale). Il peut détecter à la fois le PLOD3 pleine longueur et d'éventuels fragments N-terminaux.

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