Anticorps polyclonal de lapin spécifique à PKM1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P14618

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PKM1 (Pyruvate Kinase M1)

• Le PKM1 est une isoforme de la pyruvate kinase générée par épissage alternatif du gène PKM, principalement exprimée dans les tissus adultes (PubMed:18337823). Références connexes : PMID:18337823
• Il catalyse l'étape finale limitante de la glycolyse, transférant un groupe phosphoryl du phosphoénolpyruvate (PEP) à l'ADP, produisant de l'ATP (PubMed:15996096, PubMed:1854723, PubMed:20847263). Références connexes : PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Le PKM1 existe sous forme de tétramère constitutivement actif et ne nécessite pas d'activation allostérique par le fructose-1,6-bisphosphate (FBP), contrairement à l'isoforme embryonnaire M2 (PubMed:20847263). Références connexes : PMID:20847263
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, cohérente avec son rôle dans la glycolyse.
• Le PKM1 est exprimé dans la plupart des tissus adultes différenciés, y compris le muscle et le cerveau, et est notablement absent ou régulé à la baisse dans de nombreuses cellules tumorales, où M2 prédomine (PubMed:18337823). Références connexes : PMID:18337823
• La protéine subit diverses modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et la méthylation, qui peuvent réguler son activité et sa stabilité.
• Le PKM1 joue un rôle critique dans le métabolisme énergétique en déterminant le devenir des carbones du glucose vers la production d'ATP plutôt que vers les voies biosynthétiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique situé dans la région C-terminale (aa 350-450) du PKM1 humain, garantissant la spécificité de l'isoforme. Validez la spécificité en comparant l'expression de PKM1 et PKM2 dans des lysats de contrôle.
• Pour le Western blotting, utilisez des lysats de tissus humains, de souris ou de rat adultes (par exemple, muscle squelettique, cerveau) comme témoins positifs. Optimisez la dilution de l'anticorps en fonction du type d'échantillon.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), attendez-vous à un marquage cytoplasmique. Incluez des étapes appropriées de récupération d'antigène et de blocage.
• Les anticorps polyclonaux peuvent présenter une variabilité d'un lot à l'autre ; envisagez une validation spécifique au lot pour les expériences critiques.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet une utilisation dans des organismes modèles courants, mais confirmez l'homologie de la séquence de la région de l'immunogène si d'autres espèces sont testées.

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