Anticorps polyclonal de lapin anti-PKC delta pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q05655

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la PKC delta

• La PKC delta (nPKC-delta) est une sérine/thréonine kinase indépendante du calcium, dépendante des phospholipides et du diacylglycérol, codée par PRKCD et appartenant à la famille des protéines kinases C (PKC).
• Elle agit à la fois comme une protéine pro-apoptotique et anti-apoptotique : elle favorise l'apoptose induite par les dommages à l'ADN via les voies BCLAF1/p53 et ABL1, tout en favorisant la survie des cellules cancéreuses par l'intermédiaire des voies de signalisation AKT1, NF-kappa-B et MAPK1/3. Références associées : PMID:21406692 PMID:21810427 PMID:15774464
• Elle régule la production d'espèces réactives de l'oxygène en phosphorylant NCF1/p47-phox dans les neutrophiles, et module l'agrégation plaquettaire, la formation de filopodes et la sécrétion des granules denses. Références associées : PMID:19801500 PMID:11748588 PMID:16940418 PMID:19587372
• Elle se localise dans le cytoplasme, la région périnucléaire, le noyau, la membrane cellulaire, les mitochondries et le système endomembranaire, ce qui lui permet d'assurer diverses fonctions de signalisation.
• Elle phosphoryle de nombreux substrats, notamment les protéines 14-3-3, ELAVL1, PLSCR3, SMPD1 et GLI1, et est elle-même régulée par phosphorylation, avec des domaines à doigt de zinc et de liaison à l'ATP. Références associées : PMID:18285462 PMID:12649167 PMID:17303575 PMID:19015273
• Elle est fortement exprimée dans plusieurs cancers et est associée à une résistance aux agents chimiothérapeutiques ; les mutations de PRKCD sont associées à l'ALPS3 et à la CVID9.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1 à 160 de la PKC delta humaine, ce qui peut entraîner la production d'anticorps polyclonaux reconnaissant plusieurs épitopes.
• Pour le western blot (WB), prévoir une bande proche de 78 kDa ; envisager des conditions réductrices et valider le produit dans des lysats cellulaires humains, murins ou de rat.
• Pour l'IHC-P et l'IF/ICC, effectuer les étapes appropriées de fixation et de perméabilisation ; optimiser empiriquement la dilution de l'anticorps, en commençant par 1:50–1:200.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, évaluer la cohérence entre les lots s'il est utilisé dans des dosages quantitatifs ; inclure des contrôles par extinction ou invalidation génique afin de confirmer la spécificité.

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