Anticorps monoclonal de lapin anti-PKC alpha pour IF/ICC, ELISA - P17252

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine kinase C de type alpha

• La protéine kinase C de type alpha (PKCα), codée par le gène PRKCA (alias : PKCA, PRKACA), est une sérine/thréonine-protéine kinase dépendante du calcium, des phospholipides et du diacylglycérol (DAG). Elle appartient à la famille des kinases PKC, qui jouent un rôle clé dans diverses voies de transduction du signal.
• La PKCα est impliquée dans la régulation positive et négative de la prolifération cellulaire, de l'apoptose, de la différenciation, de la migration, de l'adhésion, de la tumorigenèse, de l'hypertrophie cardiaque, de l'angiogenèse, de la fonction plaquettaire et de l'inflammation. Elle phosphoryle directement des cibles comme RAF1, BCL2, CSPG4, TNNT2/CTNT, et active les cascades de signalisation MAPK/ERK et RAP1GAP.
• En biologie du cancer, la PKCα est fortement exprimée dans diverses tumeurs, y compris les gliomes et les cancers du sein, où elle peut agir comme un promoteur tumoral. Elle exerce des fonctions anti-apoptotiques en supprimant l'activation de l'IGFBP3 médiée par p53 et en phosphorylant BCL2. Dans les cellules de gliome, elle favorise la croissance cellulaire via RAF1/MAPK/ERK.
• La PKCα régule la dynamique du cytosquelette et la migration cellulaire. Par exemple, elle phosphoryle CSPG4, induisant la formation de lamellipodes et la polarisation cellulaire. Pendant la migration des lymphocytes T CD4+ induite par les chimiokines, la PKCα phosphoryle DOCK8, conduisant à l'activation de CDC42 et à une motilité accrue. Références associées : PMID:28028151
• La localisation subcellulaire de la PKCα est dynamique : elle circule entre le cytoplasme, la membrane cellulaire, la membrane mitochondriale et le noyau, en fonction de la stimulation. Ce trafic est essentiel pour ses fonctions de signalisation dans des processus comme la différenciation des macrophages et la cicatrisation des plaies.
• Dans le système cardiovasculaire, la PKCα régule négativement la contractilité myocardique en phosphorylant la troponine T cardiaque (TNNT2/CTNT), ce qui réduit l'activité ATPase de l'actomyosine et la sensibilité au calcium. Elle favorise également l'hypertrophie cardiaque via la signalisation MAPK/ERK et est essentielle à l'angiogenèse, en médiant la migration des cellules endothéliales et la signalisation dépendante du VEGFA.
• La PKCα est soumise à des modifications post-traductionnelles, y compris la phosphorylation et l'acétylation, qui modulent son activité et ses interactions. C'est également un proto-oncogène et une entrée de protéome de référence (mots-clés UniProt : Acétylation, Apoptose, Liaison à l'ATP, Calcium, Adhésion cellulaire, Membrane cellulaire, Cytoplasme, Séquençage protéique direct, Kinase, Membrane, Liaison aux métaux, Mitochondrie, Liaison aux nucléotides, Noyau, Phosphoprotéine, Identification en protéomique, Proto-oncogène, Protéome de référence, Répétition, Sérine/thréonine-protéine kinase, Transférase, Zinc, Doigt de zinc).
• La PKCα phosphoryle KLHL3 en réponse à l'angiotensine II, affectant la signalisation WNK4 et l'homéostasie ionique. Elle active également LRRK1, qui phosphoryle ensuite les protéines RAB pour réguler le trafic intracellulaire. Références associées : PMID:25313067 PMID:36040231

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé est la protéine recombinante humaine PKC alpha. Cette conception produit généralement des anticorps reconnaissant les conformations protéiques natives. Pour l'IF/ICC, envisagez d'optimiser les conditions de fixation/permeabilisation pour préserver la localisation subcellulaire de la cible (cytoplasme, membrane, noyau).
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour détecter la PKCα dans des lysats cellulaires ou des échantillons de protéines purifiées. Associez-le à un système de détection approprié et validez-le dans le système d'échantillon pertinent pour garantir la spécificité.
• L'activation de la PKCα implique souvent une translocation ; par conséquent, dans les expériences d'IF/ICC, une stimulation avec des agonistes comme le PMA peut révéler des schémas de redistribution dynamiques. Incluez toujours des contrôles appropriés.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain ; vérifiez la réactivité avec d'autres espèces si nécessaire.

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